Vliv Potravinové Matrice Dodání Systému na Biologickou dostupnost Vitamínu D3 (DFORT)

POZADÍ aktuální projekt je součástí vitaminu D opevnění s lepší biologickou dostupnost studijního programu (zkratka: DFORT), která je interdisciplinární projekt, včetně výzkumné skupiny z Dánska, Španělska a Nizozemska podpořila dánská Nadace Inovace. Celkovým cílem DFORT je vyvinout účinnější strategie pro vitamin D opevnění studiem vlivu dodání matice na biologickou dostupnost vitaminu D. DFORT je rozdělen do čtyř vědeckých pracovních balíčků (WP).

první dva WPs cílem studovat, zda komplexní tvorbu (nano-encapsulation) vitaminu D s různými proteiny mohou zvýšit stabilitu vitaminu D (WP 1 prof. Daniel Otzen, AU-iNANO) a vliv tvorby komplexů v reálném potravinových systémů včetně vyšetřování stability během skladování, světlo a teplo-expozice (WP 2 čele docent Trine Kastrup Dalsgaard, AU-JÍDLO). WP 1+2 ukázaly, že vitamin D může být stabilizována tvorba komplexů s syrovátkové bílkoviny a to zapouzdření může způsobit méně oxidativní degradaci, čímž zlepšuje stabilitu vitaminu D v různých potravinových systémů.

v současné studii (WP 3 pod vedením prof. Lars Rejnmark, AU-Health), biologická dostupnost vitaminu D v různých potravinářských matricích (včetně komplexní tvorby se syrovátkovým proteinem) bude studována u lidí. Biologické vzorky budou shromažďovány ve WP 3 umožňuje pro metabolomické studie o možné souvislosti mezi vitamin D suplementace prostřednictvím různých matricích potravin a metabolický fenotyp (WP 4 prof. Hanne Bertram C., AU-JÍDLO).

i když většina z celkové tělesné vitamin D je syntetizován v kůži po expozici UV záření (vlnové délce 290-315 nm), většina jedinců vyžadují alespoň nějaké dietní vitamin D k udržení plného stavu vitamínu D. To platí zejména v zimním období. S zeměpisné šířky, 56°N v Dánsku, tam je žádné endogenní syntéza vitaminu D v měsících rozšiřuje od října do dubna, což znamená, že obyvatelé musí spoléhat na potravinové zdroje v zájmu zachování plné vitamínu D stav. Cholekalciferol (vitamin D3) je hlavním zdrojem vitaminu D, ale je přítomen pouze v omezeném počtu potravin (jako jsou mastné ryby), což ztěžuje dosažení doporučeného příjmu 10 µg D3 denně.

stav vitaminu D může být zlepšen v reakci na zvýšený příjem vitaminu D, pokud jde o suplementaci tabletami nebo obohacení potravin. Četné studie prokázaly zvýšené 25-hydroxy vitamin D (25OHD) v krvi v reakci na zvýšený příjem vitaminu D. obecně se předpokládá, že znamená 25OHD koncentrace zvýší o 0.7 nmol / L v reakci na zvýšený dlouhodobý příjem 1 µg vitaminu D denně, i když relativní zvýšení na doplněný mikrogram může být vyšší, pokud jsou výchozí hladiny nízké. Přes tento dobře známý vztah mezi dávkou a odpovědí u skupin lidí několik studií dokumentovalo, že změna hladin 25ohd v séru v reakci na suplementaci vitamínem D se velmi liší.

interindividuální variace v reakci na suplementaci vitamínem D může představovat několik důvodů. V hrubém vyjádření, že změna může být způsobeno dávkování nepřesnosti (nesrovnalosti mezi požadované a skutečné hodnoty vitaminu D) a rozdíly v biologické dostupnosti vitamínu D.

Rozpory mezi požadované a naměřené hodnoty vitaminu D obsah vitamin D tablety a potraviny obohacené produkty, může být v důsledku nesrovnalostí v dávce používá pro opevnění nebo nestability vitamin per se. Byly hlášeny rozporné výsledky o stabilitě vitaminu D v různých potravinářských matricích a při vystavení různým fyziochemickým rizikům. Někteří vyšetřovatelé hlásili, že vitamin D je nestabilní, zatímco jiní zjistili, že je pozoruhodně stabilní, když je vystaven oxidaci, světlu a kyselinám a zásadám.

Pouze několik studií, hledali faktory, odpovědné za interindividuální rozdíly v 25OHD úrovně v reakci na vitamin D suplementace. Tyto studie naznačují, že složení těla (včetně tuku hmotnost obsahu), genetických variant vitaminu D vazebného proteinu (VDBP), a poměr sérum 24,25-dihydroxy vitamin D (24,25(OH)2D) 25OHD může přispět k variantě 25OHD v séru úrovní. V nedávné studii však bylo možné vysvětlit pouze 47% variací v reakci na suplementaci vitamínem D zohledněním faktorů známého významu pro změny hladin 25OHD.

kromě výše uvedených indexů, faktory důležité pro střevní absorpci vitaminu D, stejně jako potravinové matrice, podle které vitamin D suplementace je poskytována, mohou přispět k inter-individuální rozdíly v 25OHD odpovědi. Nicméně, jen málo studií jsou k dispozici na biologickou dostupnost vitaminu D z různých matricích potravin a střevní absorpce vitaminu D, včetně intraluminální osud, a molekulární mechanismy usnadňující vstřebávání jsou stále jen částečně rozuměl.

vitamin D je tuk-rozpustné molekuly, to je obecně předpokládal, že vitamin D je absorbován v tenkém střevě prostou pasivní difuzí s vitamínem D je začleněna do micely a transportovány do chylomikronů přes lymfatické cévy do jater. To je v souladu se studiemi, které ukazují zvýšené riziko nízkých hladin 25OHD u pacientů s malabsorpcí tuku. Proto, to bylo navrhl, že požití vitaminu D spolu s jídlem s vysokým obsahem tuku se může zvýšit uvolňování žluči, což umožňuje větší začlenění vitaminu D v žlučových solí micel a tím zlepšuje biologickou dostupnost vitamínu D. Nicméně, neshodné výsledky byly hlášeny, zda složení potraviny matice (a jeho obsahu tuku), které vitamin D je požití vliv na jeho biologickou dostupnost.

v randomizované, kontrolované studii Raimundo et al., průměrná změna hladin 25OHD dva týdny po léčbě jednou velkou perorální dávkou 50 000 IU D3 byla větší, když jídlo mělo nejméně 15 g tuku ve srovnání s jídlem bez tuku. V kontrastu, obsah tuku potravin, matice bylo zjištěno, že vliv času-koncentrační profil měřený vitamin D2 hladiny v plazmě 2, 4, 8, 12, 48, a 72 h po požití jedné dávky 25 000 IU D2 přidáno buď plnotučného mléka, odstředěného mléka nebo rozpuštěného v 0,1 mL kukuřičného oleje a aplikovat na přípitek. Obě tyto studie jsou však omezeny použitím velmi vysokých (farmakologických) dávek vitaminu D, které mohou potlačit jakékoli fyziologické účinky složení potravinových matric.

nedostatek vliv obsahu tuku z potravin, které vitamin D je požití je také podporován studie o vitaminu D opevnění pomerančové šťávy. Porovnání biologické dostupnosti vitaminu D přidaného do pomerančové šťávy nebo doplněného ve formě tobolek ukázalo podobné zvýšení koncentrací 25OHD v reakci na 11 týdnů suplementace 1000 IU vitamínem D denně a zvýšení bylo významné ve srovnání s placebem. Skutečnost, že vitamin D může být dostatečně absorbován po jídle bez tuku (jako je pomerančový džus), lze vysvětlit nedávnými zjištěními o mechanismu, kterým je vitamin D absorbován. Zdá se, že vitamin D není jen vstřebává prostou pasivní difuzí (o začlenění do micel), jako je cholesterol membránové transportéry, jako je SR-BI, CD36, nebo NPC1L1, bylo prokázáno, že být zapojen do vstřebávání. Rozdíly v úrovních exprese a existence funkčních polymorfismů v genech kódující tyto proteiny mohou také přispět k velké inter-individuální rozdíly v postprandiální odpovědi na vitamín D.

Jen velmi málo studií jsou k dispozici na čase-profil plazmatické koncentrace vitaminu D po podání perorální dávky. Denker et al. studován farmakokinetický profil přípravku vitamin D3 po podání jedné D3 dávka buď 2800 nebo 5600 IU, což ukazuje, že plazma D3 úrovní stále zvyšoval po příjmu a vyvrcholil v 9±2.3 h s koncentrací návratu k téměř výchozím hodnotám do 72 h. Není známo, zda potravinové matrice (včetně komplexní tvorbu vitaminu D zapouzdření s syrovátkových bílkovin) má vliv na biologickou dostupnost vitaminu D, jak bylo zjištĕno podle plazmatických-čas koncentrační profily a zda to může mít vliv na inter-individuální variabilita v reakci na vitamin D suplementace.

význam příjem vápníku, a to zejména příjem vápníku z mléčných výrobků a tablety (doplňky stravy) byl zkoumán v řadě studií, které ukazují rozporných výsledků. Metaanalýza Cochrane naznačila celkový příznivý účinek zvýšeného příjmu vápníku z mléčných výrobků a doplňků vápníku. Nedávná studie však naznačila zvýšení krevního tlaku v hodinách po podání 1000 mg citrátu vápenatého ve srovnání s placebem. Dosud nebylo zkoumáno, zda příjem mléka způsobuje podobné účinky na indexy kardiovaskulárního zdraví, včetně krevního tlaku a arteriální ztuhlosti.

CÍL obecným cílem studie je prozkoumat vliv různých potravinářských matricích (včetně složité-tvoření s syrovátkové bílkoviny) na biologickou dostupnost vitaminu D, jak je hodnotí maximální koncentrační profily (Cmax) a čas,-koncentrace křivku D3 v plazmě a tím, zda inter-individuální variabilita v absorpci vitaminu D může záviset na dodání systému.

Koprimární (nulová) hypotéza:

• potravinové matrice, podle nichž D3 je dodáván nemá vliv na Cmax D3, jak je stanoveno 10h po podání.
• absorpční profil (křivka Časové koncentrace z hlediska plochy pod křivkou od 0h do 12h) se neliší podle matrice potravin, kterou je D3 dodáván.

Sekundární (null-)hypotéz,

• ve Srovnání s vitamínem D za předpokladu, jako kapky, vstřebávání D3 není posílena tím, že doručení prostřednictvím každé z testovaných matricích potravin (tj. zvýšení Cmax).
• ve Srovnání s vitamínem D přidány do šťávy, vstřebávání D3 není posílena tím, syrovátkový proteinový komplex-vázané D3 (tj. zvýšení Cmax).
• léčba neovlivňuje plazmatické hladiny parathormonu (PTH) a ionizovaného vápníku.
• variabilita na vitamin D suplementace, pokud jde o Cmax je nižší, pokud vitamin D je komplex vazbou na syrovátkové bílkoviny ve srovnání s ostatními testovány doplnění metody.
• arteriální tuhost hodnocená tonometrií není ovlivněna příjmem mléka.

Vysvětlující hypotézy s cílem umožnit pro další vyšetřování o indexech, které jsou důležité pro odpovědi na vitamin D suplementace se shromažďují údaje o složení těla, genetické polymorfismy, stav cholesterolu, a obvyklé stravovací návyky.

MATERIÁLY A METODY,

DESIGN STUDIE studie se provádí jako násobek cross-over studie pomocí vyvážené latinsko-čtvercový design. Tato konstrukce umožňuje pro každého účastníka, aby fungoval jako její vlastní ovládání, čímž se vyvažující riziko nepříznivého vlivu na výsledky cílem léčby nebo další faktory, jako je vliv období, stejně jako inter-individuální rozdíly připadající např. genetické odchylky, tělesné hmotnosti atd. Tím, randomizace, každý účastník bude přiděleno pro příjem všech pěti režimy ošetření v předem určeném pořadí s 10-21 dní wash-out období v-mezi jednotlivými léčebnými rameny.

léčebné sekvence jsou:

Léčba sekvence 1: A B E C D

Léčba sekvence 2: B C D E

Léčba sekvence 3: C D B E A

Léčba pořadí 4: D E C A B

Léčba sekvence 5: E A D B C

Léčba sekvence 6: D C E B A

Léčba sekvence 7: E D C B

Léčba sekvence 8: A E B D C

Léčba sekvence 9: B C E D

Léčba sekvence 10: C B D A E,

POSTUPY PRO MANIPULACI VITAMIN D SUPLEMENTACE doplňkem budou získány komerčně a uloženy na Osteoporózu Klinice, Aarhus University Hospital a drželi se dál od jiných léků a doplnění. Sub-zkoušející je odpovědný za správnou manipulaci a výdej vitamin D doplněk, stejně jako zajištění, že doplněk bude používat pouze jak je popsáno v protokolu, a že účastníci jsou instruováni, aby si to opravit.

postupy pro randomizaci Randomizace budou provedeny pomocí seznamu generování počítače. Léčba nebude pro vyšetřovatele zaslepena. Pokud jde o porovnání šťávy s komplexy vázanými na syrovátkové proteiny nebo bez nich, použije se jednoosý design, protože účastníkům nebude řečeno, která z ošetření dostávají. Každá léčebná sekvence bude přidělena stejnému počtu pacientů-např. 3 účastníci budou v léčebné sekvenci 1, 3 v léčebné sekvenci 2 atd.

POPULACE Třicet účastníků bude z řad obecné populace pozadí tím, direct mailing, pomocí seznam náhodně vybraných osob žijících v oblasti Aarhus generované „Výzkum“ na Statens Serum Institut. Studie bude provedena v zimním období (listopad-duben).

STAŽENÍ A VYPUŠTĚNÍ každý účastník může kdykoliv vypadnout ze studie, bez jakéhokoliv vysvětlení a nebude muset projít závěrečnou zkouškou. Vyšetřovatel může účastníka stáhnout, pokud se to zdá nezbytné pro bezpečnost účastníka. Výpadky a výběry budou zaznamenány a vysvětleny v CRF.

Odstoupení od smlouvy se stane v případě jednoho z těchto kritérií je splněno:

• Změnit na vitamin D suplementace
• Ionizovaný vápník ≥1.40 mmol/L
• Nemoci nebo nové léky, které ovlivňují studium
• Závažné nežádoucí účinky/symptomy, které se očekává, že bude způsobena vitamin D suplementace Nemocí, které se vyskytují během 7 dnů léčby může být možný důvod účasti ve studii. Sub-vyšetřovatel může být v tomto časovém rámci kontaktován, aby zjistil, zda je příčinou suplementace vitamínem D. V případě, že ano, budou příznaky nebo onemocnění sledovány, dokud nebudou vyléčeny nebo se stanou chronickými.

ZKOUŠKY Účastníci budou zkoumány 5 krát po dobu 6 až 12 týdnů. Při každé návštěvě účastníci dorazí nalačno před 9: 00 a zůstanou na oddělení, dokud nebude odebrán odběr krve ve 12 hodinách. Dále účastníky je zdarma jít domů a vrátit následující den za 24 hodin odběr krve a dodání vzorků moči nebo zůstat přes noc v nemocnici. Během 12 hodin na oddělení dostanou účastníci standardizované jídlo.

Základní zdravotní informace a dotazníky:

Účastníci budou odpovídat na dotazníky týkající se jejich celkový zdravotní stav, stejně jako stravovací návyky a slunce expozice.

Biochemie:

Krevní vzorky budou shromažďovány v různých časových bodech (0, 2, 4, 6, 8, 10, 12, a 24 hodin).

všechna měření budou provedena, když bude shromážděn veškerý materiál od všech 30 účastníků, aby se zabránilo změnám ve výsledcích. Vzorky krve budou uloženy v biobance po dobu maximálně 15 let po ukončení studie.

vzorky Moči:

Moči budou shromažďovány ve 3 dávkách v první den každého dávkování, tj. od 0-4 hodiny, od 4-8 hodin a od 8-24 hodin.

všechna měření budou provedena, když bude shromážděn veškerý materiál od všech 30 účastníků.

kostní skeny:

Dual-Energie X-ray absorpciometrie (OVLADAČ?) a Vysokým Rozlišením periferní Kvantitativní Počítačová Tomografie (HRpQCT):

OVLADAČ? skenování s společnosti hologic QDR Discovery scanner. Kostní minerální hustota (BMD) bude měřena v bederní páteři (L1-L4), krčku femuru a distálním předloktí. Dále bude stanoveno Celkové složení těla, včetně hmoty tuku a libové tkáně.

hrpqct kostní sken distálního poloměru a holenní kosti bude proveden pomocí CT skeneru Xtreme (SCANCO Medical AG, Švýcarsko). To umožní posouzení volumetrické BMD pro kortikální a trabekulární kost, kostní strukturu a geometrii (včetně kortikální a trabekulární tloušťky, trabekulární separace atd.) a pevnost kostí.

měření Krevního tlaku a tonometrie:

Krevní tlak a měření tepenné tuhosti (tonometrie) se provádí dvakrát za každého účastníka ve vztahu k léčbě režimy „C“ a „D“.

v obou případech se měření provádí ráno s účastníkem ve stavu nalačno. Po provedení měření bude účastníkovi poskytnut zásah spolu se snídaní. Poté bude účastník nalačno, dokud se další měření neprovede o čtyři hodiny později.

Kancelář krevní tlak (BP) se měří v poloze vsedě po 5 minutách odpočinku na pravé paži pomocí digitální automatické BP monitor. Tři hodnoty BP budou provedeny s 2 minutami odpočinku mezi nimi. Zaznamenává se průměr posledních dvou měření.

Arteriální tuhost a pulse wave velocity (PWV) bude hodnocena tonometrie pomocí SphygmoCor systém (Xcel; AtCor Medical, Sydney, NSW, Austrálie). Pro měření krční-femorální PWV, nafukovací stehenní manžeta umístěna na pravé horní části stehna v kombinaci s krční aplanační tonometrie budou použity. Měření se provádí v klidné místnosti. Účastník bude odpočívat po dobu 10 minut v poloze na zádech před zahájením testu. Brachiální BP se měří na pravém horním rameni a provádějí se dvě po sobě jdoucí hodnoty BP. Pokud se hodnoty BP neliší > 5 mmHg, zaznamená se poslední. Pokud se hodnoty BP liší o > 5 mmHg, získají se čtyři hodnoty BP. Zaznamenává se průměr posledních dvou měření. AIx se hodnotí jako poměr amplitudy odrazu vlny k centrálnímu pulznímu tlaku. V analýzách se používá průměr dvou měření. Krční-femorální PWV je hodnocena jako ujetá vzdálenost děleno tranzitní čas pomocí přímé krční-manžety vzdálenost měřená s non-elastických pásku (infantometer). Provádí se minimálně dvě měření. Pokud se měření liší < 0.5 m / s, použije se pro analýzy průměr obou měření. Pokud se PWV liší o > 0,5 m / s, získá se třetí měření a střední hodnota se použije pro analýzy. Podle obecných doporučení je průměrná vzdálenost mezi krkavicí a manžetou PWV násobkem 0,8.