Protéine de surface externe recombinante A (des-Cys1-OspA) de la maladie de Lyme spirochète Borrelia burgdorferi: niveaux de production élevés dans les cultures de levures Saccharomyces cerevisiae

La protéine de surface externe recombinante A avec une forme tronquée N-terminale (des-Cys1-OspA) de la maladie de Lyme spirochete Borrelia burgdorferi a été exprimée dans Saccharomyces cerevisiae à des niveaux de production élevés. Comme le candidat vaccin recombinant exprimé dans Escherichia coli présente de faibles rendements de production et que la purification des lipoprotéines semble difficile, nous avons étudié la sécrétion d’un OspA recombinant soluble dans la levure S. cerevisiae. De cette manière, un dérivé Leu+ de S. cerevisiae cI3ABYS86 a été utilisé comme souche hôte transformée par un plasmide d’expression contenant le gène codant pour des-Cys1-OspA et piloté par le promoteur MF alpha 1. Les résultats de culture par lots nourris ont révélé qu’une sécrétion efficace de des-Cys1-OspA est obtenue avec un niveau de production élevé d’environ 2.1 g l-1 à une densité cellulaire de 101 g l-1 poids sec des cellules. L’accumulation de protéine recombinante dans le surnageant dépasse 6% du total des protéines de levure lorsqu’elle est estimée par électrophorèse sur gel dodécylsulfate de sodium/polyacrylamide. De plus, des-Cys1-OspA présente des solubilités plus faibles à des densités cellulaires élevées et, par conséquent, une fraction de la protéine recombinante précipite. Un clivage interne du précurseur MF alpha 1 pro::des-Cys1-OspA a également été détecté. Cependant, dans ce cas, le clivage s’est produit à une fréquence telle que les grandes quantités de des-Cys1-OspA sécrétées pouvaient être utilisées pour l’évaluation d’un effet immunogène sur l’immunisation animale. Ces études permettront d’étendre les connaissances sur l’utilité de l’OspA comme vaccin contre la borréliose de Lyme.