Effetti di due probiotici spore di Bacillus specie ematologici, biochimici, e i parametri infiammatori in Salmonella Typhimurium ratti infetti

Enumerazione di Salmonella

Per saperne di B. subtilis e B. coagulans effetti sulla prevalenza di Salmonella conte nel tratto digerente e la sua infiltrazione per gli organi target, il numero di S. Typhimurium nel fegato, nella milza, nei linfonodi mesenterici, nelle feci e nel contenuto di ileo e cieco è stato contato nei giorni 1, 3, 5 e 7 dopo aver somministrato la salmonella. I risultati sono illustrati in dettaglio nelle tabelle 1 e 2. Nessuna salmonella è stata isolata dai gruppi di controllo Blank e Probiotic Control in tutti i giorni di campionamento. Il primo giorno di campionamento, mediante placcatura diretta, il numero di Salmonella nel fegato, nella milza e nei linfonodi mesenterici di tutti e quattro i gruppi di trattamento era pari a zero. Ma utilizzando l’arricchimento selettivo, i linfonodi di quattro ratti e il fegato di un ratto del gruppo Salmonella e i linfonodi di un ratto del gruppo probiotico+Salmonella hanno mostrato la presenza di Salmonella. Nei giorni 3rd, 5th e 7th post gavaging, la salmonella era numerabile nel fegato, nella milza e nei linfonodi dei gruppi di salmonella e probiotici+Salmonella. I risultati mostrano che il numero di salmonella è più alto nei linfonodi che nel fegato e nella milza (P < 0,05). Usando i probiotici, il numero di Salmonella nel fegato, nella milza e nei linfonodi mesenterici è stato significativamente ridotto in tutti e tre i giorni di campionamento(P < 0,05); inoltre, i risultati mostrano che nel tempo, la tendenza alla riduzione della salmonella è aumentata. Il numero di salmonella escreta nell’ileo, nel cieco e nelle feci è aumentato fino al 5 ° giorno dopo il gavaging e diminuito di nuovo il 7 ° giorno, che era simile nei gruppi di salmonella e probiotici+Salmonella. Tuttavia, il numero di salmonella nell’ileo (P <0.05), cieco (P< 0.05) e le feci nel gruppo probiotico + Salmonella erano inferiori al gruppo Salmonella dal primo giorno di campionamento.

Tabella 1 Numero di Salmonella (Log CFU / gr) nel fegato, nella milza e nei linfonodi mesenterici di ratti con trattamenti diversi in 1, 3, 5 e 7 giorni dopo il dosaggio della salmonella.
Tabella 2 Numero di Salmonella (Log CFU / gr) nell’ileo, nel cieco e nelle feci di ratti con trattamenti diversi in 1, 3, 5 e 7 giorni dopo aver somministrato la salmonella.

Il coefficiente di correlazione tra il numero di Salmonella nell’ileo, cieco e feci il numero di Salmonella nel fegato è stata 0.67, lo 0,54 e 0,69; nella milza era 0,72, 0,83 e 0.71; e nei linfonodi mesenterici era 0,72, a 0,78 0,66, rispettivamente (P < 0.05).

Come mostrano i risultati, i probiotici B. subtilis e B. i coagulani non hanno inibito completamente l’infiltrazione della salmonella nei linfonodi, ma hanno causato un’infiltrazione ritardata della salmonella nei linfonodi e di conseguenza nella milza e nel fegato. Inoltre, i probiotici accelerano la cancellazione di questo agente patogeno nel gruppo infetto. Come hanno dimostrato studi precedenti, i probiotici hanno l’effetto benefico di prevenire la colonizzazione di batteri patogeni nel tratto digestivo, la competizione per i nutrienti e i recettori di adesione e la stimolazione dell’immunità dell’ospite20,21. Poiché il numero di salmonella era ai livelli più alti nel 5 ° giorno dopo il gavaging e le differenze tra i due gruppi, si può dire che B. subtilis e B. coagulans riducono la colonizzazione e l’invasione di S. Typhimurium. Vila et al. (2009) ha anche mostrato che B. cereus var. toyoi diminuire la colonizzazione e l’invasione di S. Entritidis nella broiler22. La Ragione e Woodward (2003) hanno dimostrato che somministrare B. subtilis anche un giorno prima di ricevere S. Entertidis, riduceva il numero di Salmonella nel fegato, nella milza, nel digiuno, nell’ileo, nel colon e nel cieco. Il numero di S. Enteritidis recuperato da caeca di pulcini che avevano ricevuto una pre-dose di spore B. subtilis era significativamente inferiore rispetto al gruppo di controllo che non aveva ricevuto B. subtilis12. Feng et al. (2016) ha dimostrato che Lactobacillus plantarum PZ01, Lactobacillus salivarius JM32 e Pediococcus acidilactici JH231 hanno ridotto il numero di salmonella nel contenuto intestinale, nella milza e nel fegato durante un’infezione da salmonella nei polli da griglia5. Oltre a ciò, Barba-Vidal et al. (2017) ha dimostrato che la somministrazione di Bifidobacterium longum subsp. infantis CECT 7210 e Bifidobacterium animalis subsp. lactis BPL6 in un modello di suinetti di svezzamento non è stato in grado di prevenire l’infezione da salmonella, poiché la maggior parte di essi è diventata positiva nelle feci un giorno dopo la sfida. Nonostante ciò, il probiotico è stato in grado di ridurre il carico patogeno nel colon e nelle feci, suggerendo il potenziale della combinazione di bifidobatteri per escludere la Salmonella23.

Parametri ematologici

I risultati hanno mostrato che la percentuale di volume delle cellule (PCV), il numero di globuli rossi (RBC) (fino al 5 ° giorno) e la concentrazione di emoglobina (Hb) (fino al 3 ° giorno) erano maggiori nel gruppo della Salmonella rispetto agli altri gruppi (P< 0,05). Mentre, questi valori sono tornati all’intervallo normale entro il giorno 7 (Tabella 3). Questi incrementi sono stati il risultato di una grave disidratazione nel gruppo della salmonella, che si è verificata a causa della diarrea22. Nel gruppo di salmonella, lo sgabello è stato più sciolto rispetto al gruppo di controllo in bianco per 3 giorni dopo il gavaging. Studi precedenti hanno dimostrato che la Salmonella Typhimurium aumenta la quantità di Hb, PCV e RBC di maiali23 e calves24. Nel gruppo trattato con salmonella la conta dei globuli rossi ha avuto una tendenza decrescente dal 1 ° giorno al 7 ° giorno di infezione (P < 0,05). Tuttavia, nel gruppo probiotico + Salmonella non vi è stato alcun aumento della concentrazione di PCV, RBC e Hb e questi parametri erano simili al gruppo di controllo in bianco. Nel gruppo probiotico + Salmonella, la salmonella ha mostrato una patogenicità inferiore a causa della presenza di probiotici attivi che impedivano la colonizzazione della salmonella e gareggiavano per i nutrienti e i recettori di aderenza20,21.

Tabella 3 PCV, Hb e RBC di campioni di sangue di ratti con trattamenti diversi in 1, 3, 5 e 7 giorni dopo il dosaggio della salmonella.

I risultati mostrano che non è stata osservata alcuna differenza significativa nella conta piastrinica (P> 0,05) (Dati non mostrati).

Il numero di globuli bianchi (WBC) e neutrofili nel gruppo della Salmonella era significativamente più alto rispetto agli altri gruppi dal primo giorno dopo il dosaggio. La conta dei globuli bianchi e dei neutrofili è stata aumentata durante tre giorni di infezione e poi ha iniziato a scendere dal giorno 5 in poi. L’uso di probiotici prima di somministrare salmonella, ha ridotto la tendenza crescente dei livelli di WBC e neutrofili e alla fine ha portato i livelli di questi due indicatori all’intervallo normale entro il giorno 5. Il giorno 7, non ci sono state differenze significative nel numero di WBC e neutrofili tra i gruppi di salmonella e probiotici+Salmonella (P > 0.05). I conteggi erano superiori ai gruppi di controllo Blank e Probiotic Control (Tabella 4).

Tabella 4 I parametri ematologici di campioni di sangue di ratti con trattamenti diversi in 1, 3, 5 e 7 giorni dopo il dosaggio della Salmonella.

L’introduzione della Salmonella ha aumentato significativamente il numero di linfociti rispetto al gruppo di controllo in bianco (P< 0,05). Durante l’utilizzo di probiotici prima di somministrare salmonella, ha ridotto significativamente la tendenza crescente dei linfociti (P < 0,05). Questi risultati sono rimasti validi dai giorni 1 a 5, ma al 5 ° giorno non sono state osservate differenze significative tra i gruppi di salmonella e probiotici+Salmonella (P > 0.05). Il 7 ° giorno, il numero di linfociti nel gruppo probiotico + Salmonella è tornato a livelli normali e non ci sono state differenze nei livelli rispetto al gruppo di controllo in bianco. Tuttavia, il gruppo salmonellale aveva livelli maggiori di linfociti rispetto agli altri tre gruppi (P < 0,05) (Tabella 4).

Non sono state osservate differenze significative nei livelli di monociti, eosinofili e basofili tra i quattro gruppi di trattamento (P> 0,05) (Dati non mostrati).

Il coefficiente di correlazione tra il numero di Salmonella nell’ileo, cieco, feci, fegato, milza e linfonodi mesenterici con il numero di GLOBULI bianchi erano 0.32, 0.36, 0.30, a 0,33 0,47 e 0.48; neutrophile era 0.26, 0.32, 0.24, 0.29, 0,47 e 0.47; e linfociti era 0,32, 0.36, 0.30, 0.30, 0,44 e 0,45, rispettivamente (P < 0.05).

In questo studio sperimentale, il numero di WBC nel gruppo della salmonella era significativamente maggiore rispetto ad altri gruppi dal primo giorno dopo il gavaging a causa dell’aumento dei neutrofili e dei linfociti. Ciò è stato confermato anche prima che la salmonella causasse aumenti dei neutrofili e dei linfociti, con conseguente aumento della conta WBC 24,25. Inoltre, l’aumento del numero di salmonella nell’ileo, nel cieco, nelle feci, nel fegato, nella milza e nei linfonodi mesenterici era accompagnato da un aumento del numero di WBC, neutrofili e linfociti (P < 0,05). Tuttavia, nel gruppo probiotico+Salmonella, questi livelli sono aumentati dopo un ritardo. Questi risultati indicherebbero che B. subtilis e B. coagulans diminuiscono gli effetti di S. Typhimurium. Inoltre, nel gruppo probiotico + Salmonella, le complicanze da S. Typhimurium sono osservate in un periodo di tempo più breve e le modifiche sono tornate alla base normale più rapidamente rispetto al gruppo di salmonella. Havelaar et al. (2001) ha mostrato che S. Enteritidis nei ratti causa cambiamenti rilevabili nella conta dei neutrofili da dosi di 104 CFU verso l’alto e grandi aumenti dei livelli di WBC e neutrofili sono stati osservati dopo cinque giorni. Questi risultati hanno mostrato che tutti i tipi di leucociti, ad eccezione degli eosinofili, hanno rapporti positivi26.

Parametri biochimici

Non vi è stata alcuna differenza significativa nei parametri biochimici tra i gruppi di controllo Blank e Probiotic Control (P> 0.05). L’infezione da Salmonella ha aumentato la quantità totale di proteine e globuline nel sangue (P < 0,05), ma non ha avuto alcun effetto significativo sull’albumina sierica del sangue (P > 0,05). Il consumo di probiotici nel gruppo della salmonella, ha ridotto significativamente i livelli totali di proteine e globuline (P < 0.05) e ha portato questi livelli vicino ai valori di controllo (Tabella 5). La quantità di globulina e proteine totali nei giorni 1st, 3rd e 5th era significativamente più alta nel gruppo di salmonella rispetto al gruppo Probiotico+Salmonella, ed entrambi erano superiori al gruppo di controllo in bianco. Il 7 ° giorno con il gruppo probiotico + Salmonella, la quantità di globulina e proteine totali era simile al gruppo di controllo in bianco. L’inoculazione orale della salmonella, stimola le risposte immunitarie, comprese le risposte umorali e cellulo-mediate, che aumenta il livello sierico di immunoglobulina e porta ad un aumento della proteina totale27. Come mostrano i risultati, non sono state osservate differenze nella quantità di albumina tra i gruppi. Pertanto, i cambiamenti nella proteina totale sono dovuti al cambiamento nella quantità di livelli di globina. L’aumento del numero di Salmonella nel fegato, nella milza e nei linfonodi mesenterici è stato accompagnato da globulina sierica e aumento delle proteine totali (P < 0,05). Il coefficiente di correlazione tra il numero di Salmonella nel fegato, nella milza e nei linfonodi mesenterici con la quantità di proteine totali del sangue era 0,25, 0,28 e 0,35; globulina era 0,25, 0,35 e 0,43, rispettivamente. Il B. subtilis e B. coagulans riducono i livelli della globulina ed anche i livelli totali della proteina rispetto al gruppo della salmonella. Ciò indica che B. subtilis e B. coagulans riducono l’effetto patogeno di S. Typhimurium. Abudabos et al. (2016) ha dimostrato che il bacillo come probiotico non ha avuto alcun effetto sui livelli totali di proteine, globuline e albumina. Quando esposti alla salmonella, i probiotici inibiscono le diminuzioni di albumina e gli aumenti di globulina che hanno portato al controllo positivo della Salmonella28.

Tabella 5 I parametri biochimici di campioni di sangue di ratti con diversi trattamenti in 1, 3, 5 e 7 giorni dopo il dosaggio della salmonella.

Non c’è stata alcuna differenza significativa nella quantità di fosfatasi alcalina (ALP) tra quattro gruppi durante i giorni di campionamento (P> 0.05) (Dati non mostrati). Non sono state osservate differenze significative nella quantità di alanina transaminasi (ALT) e aspartato transaminasi (AST) tra i quattro gruppi fino al 5 ° giorno di campionamento (P > 0.05), mentre, al 7 ° giorno, la Salmonella ha causato un significativo aumento di ALT e AST (P < 0.05). Il consumo di probiotici ha mantenuto il livello di questi due enzimi nel range di normalità per tutto il periodo di campionamento (Tabella 6). L’aumento di ALT e AST al 7 ° giorno dopo l’inoculazione orale nel gruppo di salmonella, indica l’infiammazione e il danno nel fegato29. Tuttavia, nel gruppo probiotico + Salmonella, non è stato osservato alcun aumento, il che significa che B. subtilis e B. coagulans inibiscono l’effetto patogeno di S. Typhimurium e infiammazione nel fegato. Anche minori cambiamenti nel fattore epatico nel gruppo probiotico + Salmonella sono dovuti al minor numero di salmonella in questo gruppo rispetto al gruppo Salmonella.

Tabella 6 I parametri ematologici di campioni di sangue di ratti con trattamenti diversi in 1, 3, 5 e 7 giorni dopo il dosaggio della Salmonella.

Durante le infezioni, S. Typhimurium si diffonde sistemicamente dai cerotti di Peyer al fegato e alla milza, dove continua a crescere all’interno dei macrofagi30,31. La glicolisi è necessaria per la replicazione intracellulare e la sopravvivenza di S. Typhimurium nei macrofagi32. La riduzione del glucosio potrebbe essere dovuta ad un maggiore assorbimento di glucosio nel sangue quando il metabolismo risponde all’infezione da salmonella23. Nel gruppo della salmonella, le quantità di glucosio sono aumentate nei giorni 1st e 3rd post inoculazione (Tabella 6), ma sono rimaste entro il range normale nel gruppo Probiotico+Salmonella, il che significa B. subtilis e B. coagulans riducono gli effetti della salmonella. L’aumento del numero di Salmonella nell’ileo, nel cieco, nelle feci, nel fegato e nella milza è stato accompagnato da una riduzione del glucosio sierico (P < 0,05). Il coefficiente di correlazione tra il numero di Salmonella nell’ileo, nel cieco, nelle feci, nel fegato e nella milza con il glucosio sierico era -0,28, -0,31, -0,26, -0,22 e -0.22 in ordine (P < 0.05).

L’infezione da salmonella ha aumentato significativamente il livello di lattato deidrogenasi (LDH) (P< 0,05). L’LDH è riconosciuto come marker per la tossicità cellulare e la quantità inferiore indica lesioni cellulari inferiori33. L’uso di probiotici nei ratti infetti da salmonella, porta a un incremento minore del livello di LDH, tuttavia, era ancora superiore al controllo in bianco e ai gruppi di controllo probiotici (P< 0.05) (Tabella 7). Questo indica che B. subtilis e B. i coagulani diminuiscono le lesioni cellulari provocate dalla salmonella. L’aumento del numero di salmonella nell’ileo, nel cieco, nelle feci, nel fegato, nella milza e nei linfonodi mesenterici è stato accompagnato da aumenti di LDH (P < 0,05).

Tabella 7 I parametri biochimici di campioni di sangue di ratti con diversi trattamenti in 1, 3, 5 e 7 giorni dopo il dosaggio della salmonella.

Nel gruppo di salmonella, i livelli di creatina sono aumentati dal 5 ° giorno di gavaging. La stessa tendenza è stata osservata nell’azoto ureico nel sangue (BUN) nei giorni 5th e 7th del campionamento, che indicava disfunzione renale. È stato anche menzionato da Doorn et al. (2006) che nell’infezione da salmonella si è verificata una disfunzione renale e questo causa un aumento della BNU e della creatinina34. Nel gruppo probiotico + Salmonella, la quantità di creatina e BUN era simile ai gruppi di controllo Blank e Probiotic Control (P > 0.05) in tutti i giorni di campionamento (Tabella 7). Indica che B. subtilis e B. coagulans inibiscono l’effetto patogeno di S. Typhimurium sui reni.

L’aumento del numero di Salmonella nel fegato, nella milza e nei linfonodi mesenterici è stato accompagnato da aumenti di BUN e creatina (P< 0,05). Il coefficiente di correlazione tra il numero di Salmonella nel fegato, nella milza e nei linfonodi mesenterici con la quantità di creatina era 0,28, 0,40 e 0,45; e BUN era 0,41, 0,59 e 0,53, rispettivamente (P < 0,05).

Il livello di ferro totale nel gruppo della salmonella è aumentato significativamente nei giorni 1, 3 e 5, per poi tornare alla gamma normale il 7 ° giorno. S. Typhimurium secerne siderofori per legarsi al ferro ferrico35. Tuttavia l’uso di probiotici ha mantenuto il livello totale di ferro nel sangue entro il range di normalità in tutti i giorni di campionamento (Tabella 7). Nel gruppo probiotico + Salmonella, è stato più alto solo il 1 ° giorno e dopo è tornato al range di normalità. Ciò suggerirebbe che, tuttavia, la salmonella provoca un aumento della quantità di ferro sierico, ma i probiotici inibiscono questo meccanismo. Geith et al. (2015) ha riportato un ruolo benefico del Lactobacillus acidophilus sulla modifica dei parametri di fase acuta come diminuzione del fibrinogeno, ESR, TIBC (total iron-binding capacity), UIBC (insaturated iron-binding capacity) e ceruloplasmina e d’altra parte aumento dell’albumina, della proteina totale, del ferro e della percentuale di saturazione della transferrina durante l’infezione da S. Typhimurium nei ratti albini4.

Determinazione dei mediatori dell’infiammazione

Il livello dei mediatori dell’infiammazione, inclusi TNF-α, amiloide sierico A (SAA) e IL-10 nel gruppo di controllo probiotico e nel gruppo di controllo in bianco era simile (P> 0,05). L’infezione da salmonella ha aumentato significativamente il livello di TNF-α e SAA in tutti i giorni di campionamento (P < 0,05). Con il gruppo probiotico + Salmonella, il livello di questi due mediatori infiammatori è diminuito significativamente rispetto al gruppo della salmonella (P < 0.05), ma era ancora superiore ai gruppi di controllo Blank e Probiotic Control (P < 0.05) (Figs. 1 e 2).

Figura 1
figura 1

La quantità di TNF-α (pg/ml) in campioni di siero di ratti con diversi trattamenti in 1, 3, 5 e 7 giorni dopo gavaging Salmonella. I valori sono la media di 5 repliche indipendenti. Gruppo di controllo in bianco: acqua ricevente; Gruppo di controllo probiotico: acqua ricevente contenente 5 × 107 spore / ml di B. subtilis e 5 × 107 spore / ml di B. coagulans; Gruppo di salmonella: Ricezione di acqua e gavage intragastrico di 1 × 109 CFU di S. Typhimurium; Probiotic+Salmonella group: Ricezione di acqua contenente 5 × 107 spore / ml di B. subtilis e 5 × 107 spore / ml di B. coagulans e gavage intragastrico di 1 × 109 CFU di S. Typhimurium. La linea di controllo in bianco e gruppi di controllo probiotici sono sovrapposti. Lettere diverse indicano differenze significative tra i gruppi in ogni giorno (P < 0.05).

Figura 2
figura2

La quantità di Siero Amiloide A (µg/ml) in campioni di siero di ratti con diversi trattamenti in 1, 3, 5 e 7 giorni dopo gavaging Salmonella. I valori sono la media di 5 repliche indipendenti. Gruppo di controllo in bianco: acqua ricevente; Gruppo di controllo probiotico: acqua ricevente contenente 5 × 107 spore / ml di B. subtilis e 5 × 107 spore / ml di B. coagulans; Gruppo di salmonella: Ricezione di acqua e gavage intragastrico di 1×109 CFU di S. Typhimurium; Probiotic+Salmonella group: Ricezione di acqua contenente 5 × 107 spore / ml di B. subtilis e 5 × 107 spore / ml di B. coagulans e gavage intragastrico di 1 × 109 CFU di S. Typhimurium. La linea di controllo in bianco e gruppi di controllo probiotici sono sovrapposti. Lettere diverse indicano differenze significative tra i gruppi in ogni giorno (P < 0.05).

le infezioni da Salmonella sono significativamente aumentati livelli di IL-10 in tutti i giorni rispetto al gruppo di Controllo Vuoto (P < 0.05), mentre il consumo di probiotici impedisce l’aumento del livello di IL-10 fino al 3 ° giorno dopo la Salmonella gavaging. Tuttavia, il giorno 5, il livello di IL-10 è aumentato significativamente e diminuito di nuovo il 7 ° giorno rispetto al gruppo di controllo in bianco (Fig. 3). Il coefficiente di correlazione tra il numero di Salmonella nell’ileo, cieco, feci, fegato, milza e linfonodi mesenterici con il livello di TNF-α 0.39, a 0,41, 0.37, 0.46, e 0.62 0.61; con il livello di ASA è stato 0.39 a 0,43, 0.37, 0.43, 0,64 0.61; e con il livello di il-10 è stato 0.43, 0.51, a 0,41, 0.34, 0.56 e 0,59, rispettivamente (P < 0.05).

Figura 3
figura3

La quantità di IL-10 (pg/ml) in campioni di siero di ratti con diversi trattamenti in 1, 3, 5 e 7 giorni dopo gavaging Salmonella. I valori sono la media di 5 repliche indipendenti. Gruppo di controllo in bianco: acqua ricevente; Gruppo di controllo probiotico: acqua ricevente contenente 5 × 107 spore / ml di B. subtilis e 5 × 107 spore / ml di B. coagulans; Gruppo di salmonella: acqua ricevente e gavage intragastrico di 1 × 109 CFU di S. Typhimurium; Gruppo probiotico + Salmonella: Ricezione di acqua contenente 5 × 107 spore / ml di B. subtilis e 5 × 107 spore / ml di B. coagulans e gavage intragastrico di 1 × 109 CFU di S. Typhimurium. Lettere diverse indicano differenze significative tra i gruppi in ogni giorno (P < 0.05).

L’infezione sistemica e la colonizzazione batterica nell’intestino inducono proteine SAA nel fegato36. Il TNF-α è prodotto all’inizio della risposta al lipopolisaccaride (LPS) e si ritiene che sia un importante mediatore delle diverse risposte fisiopatologiche a LPS37. Inoltre, IL-10 funziona come molecola essenziale per consentire l’infezione da S. Typhimurium riducendo i determinanti infiammatori solubili che possono attivare sia le risposte immunitarie innate che adattative che limitano la diffusione di S. Typhimurium38. Nell’attuale studio, S. Typhimurium ha causato l’aumento di IL-10, TNF-α e SAA ma B. subtilis e B. coagulans riducono questi parametri. Questi probiotici riducono il numero di salmonella nell’intestino e inibiscono la colonizzazione di questo agente patogeno. Inoltre, i livelli più bassi di LPS sono testimoniati con conseguente SAA, TNF-α e IL-10 che mostrano i cambiamenti più bassi rispetto al gruppo della salmonella. La diminuzione del numero di Salmonella nell’ileo, nel cieco, nelle feci, nel fegato, nella milza e nei linfonodi mesenterici è stata accompagnata da riduzioni di SAA, TNF-α e IL-10 (P < 0,05). Feng et al. (2016) ha dimostrato che Lactobacillus plantarum PZ01, Lactobacillus salivarius JM32 e Pediococcus acidilactici JH231 hanno ridotto i livelli di fattore TNF-α indotto da lipopolisaccaridi (LITAF), IL-1β, IL-6 e IL-12 nel siero e aumentato il livello di IL-10 nel siero durante un’infezione da salmonella nei polli da griglia5.

Capacità antiossidante totale (TAC)

L’infezione da salmonella ha ridotto significativamente la quantità di TAC (P< 0,05), mentre l’uso di probiotici durante l’esposizione alla Salmonella ha aumentato il TAC (P< 0,05) (Fig. 4). Il coefficiente di correlazione tra il numero di Salmonella nell’ileo, cieco, feci, fegato, milza e linfonodi mesenterici con la quantità di TAC è stato -0.36, -0.37, -0.34, -0.39, -0.43 e -0.48 in ordine (P < 0.05).

Figura 4
figura4

La quantità di capacità antiossidante totale (TAC) (mM/L) in campioni di siero di ratti con diversi trattamenti in 1, 3, 5 e 7 giorni dopo gavaging Salmonella. I valori sono la media di 5 repliche indipendenti. Gruppo di controllo vuoto: La ricezione di acqua; Probiotici gruppo di Controllo: Ricezione di acqua contenente 5 × 107 spore/ml di B. subtilis e 5 × 107 spore/ml di B. coagulans; Salmonella gruppo: la Ricezione di acqua e intragastrico un tubo di alimentazione 1 × 109 CFU di S. Typhimurium; Probiotici+Salmonella gruppo: la Ricezione di acqua contenente 5 × 107 spore/ml di B. subtilis e 5 × 107 spore/ml di B. coagulans e intragastrico un tubo di alimentazione 1 × 109 CFU di S. Typhimurium. Lettere diverse indicano differenze significative tra i gruppi in ogni giorno (P < 0.05).

Durante i processi infiammatori, l’attivazione dei fagociti e i prodotti batterici aumentano la flavoproteina NADPH ossidasi multicomponente, che catalizza la produzione di elevate quantità di radicali anionici superossido. Di conseguenza, il corpo richiede livelli adeguati di antiossidante per evitare gli effetti nocivi delle specie reattive dell’ossigeno. Quindi, gli antiossidanti sono necessari per regolare le reazioni che rilasciano radicali liberi39. S. Typhimurium aumenta lo stress ossidativo. LP di S. Il Typhimurium può indurre la generazione di H2O2 e un declino concomitante di TAC40. In questo studio, il TAC è diminuito di più nel gruppo della salmonella rispetto al gruppo probiotico + Salmonella. L’aumento del numero di Salmonella nell’ileo, cieco, feci, fegato, milza e linfonodi mesenterici è stato accompagnato da riduzione TAC (P < 0,05). Ciò dimostra che i probiotici riducono gli effetti distruttivi dello stress indotto dalla salmonella. Inoltre, B. subtilis e B. coagulans come probiotici causano aumenti delle quantità di TAC rispetto al gruppo di controllo in bianco. Quindi questi probiotici preparano il corpo per l’esposizione al patogeno e allo stress che è causato da loro.

Misurazione della malondialdeide (MDA)

La quantità di MDA durante il periodo di campionamento è stata maggiore nei gruppi Salmonella e Probiotico+Salmonella rispetto ai gruppi di controllo Blank e Probiotic Control. L’uso di probiotici durante l’infezione da salmonella, ha ridotto l’MDA, ma la riduzione non è stata significativa (P > 0.05). Il contenuto di MDA nel gruppo di controllo probiotico era simile al gruppo di controllo Vuoto (Fig. 5).

Figura 5
figure5

La quantità di malondialdeide (MDA) (mM/L) in campioni di siero di ratti con diversi trattamenti in 1, 3, 5 e 7 giorni dopo gavaging Salmonella. I valori sono la media di 5 repliche indipendenti. Gruppo di controllo in bianco: acqua ricevente; Gruppo di controllo probiotico: acqua ricevente contenente 5 × 107 spore / ml di B. subtilis e 5 × 107 spore / ml di B. coagulans; Gruppo di salmonella: acqua ricevente e gavage intragastrico di 1 × 109 CFU di S. Typhimurium; Gruppo probiotico + Salmonella: Ricezione di acqua contenente 5 × 107 spore / ml di B. subtilis e 5 × 107 spore / ml di B. coagulans e gavage intragastrico di 1 × 109 CFU di S. Typhimurium. Lettere diverse indicano differenze significative tra i gruppi in ogni giorno (P < 0.05).

Il coefficiente di correlazione tra il numero di Salmonella nell’ileo, nel cieco, nelle feci, nel fegato, nella milza e nei linfonodi mesenterici con la quantità di MDA era 0,32, 0,32, 0,31, 0,31, 0,47 e 0,53 in ordine (P < 0.05). La malondialdeide è stata il biomarcatore più frequentemente utilizzato per la perossidazione lipidica e lo stress ossidativo in molti problemi di salute41. MDA è uno dei prodotti che è aumentato nella malattia della salmonella. L’MDA nel gruppo probiotico + Salmonella non ha alcuna differenza significativa con il gruppo Salmonella. Possiamo concludere che B. subtilis e B. coagulans come probiotici non influenzano la concentrazione di MDA. Tuttavia, i risultati di correlazione hanno mostrato un minor numero di Salmonella nell’ileo, cieco, feci, fegato, milza e linfonodi mesenterici era accompagnato da una minore quantità di MDA (P < 0,05).



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