ライム病からの組換え外表面タンパク質a(des-Cys1-OspA)spirochete Borrelia burgdorferi:Saccharomyces cerevisiae酵母培養における高生産レベル

n末端切断型(des-cys1-OspA)を有する組換え外表面タンパク質A-cys1-ospa)ライム病Spirochete borrelia burgdorferiから高生産レベルでSaccharomyces cerevisiaeで発現していた。 大腸菌で発現した組換えワクチン候補は生産収率が低く,リポ蛋白質の精製は困難であると思われるので,酵母s.cerevisiaeにおける可溶性組換えOspaの分泌を調べた。 このようにして、S.cerevisiae CI3ABYS8 6のLeu+誘導体を、des−Cys1−Ospaをコードする遺伝子を含む発現プラスミドで形質転換し、MF α1プロモーターによって駆動される宿主株 流加培養の結果は、des-Cys1-OspAの効率的な分泌が約2の高い生産レベルで得られることを明らかにした。101g l-1細胞乾燥重量の細胞密度で1g l-1。 上清中の組換えタンパク質の蓄積は、ドデシル硫酸ナトリウム/ポリアクリルアミドゲル電気泳動によって推定された場合、全酵母タンパク質の6% また、des-Cys1-OspAは、高い細胞密度で低い溶解度を示し、結果として、組換えタンパク質の画分が沈殿した。 MF α1pro::des−Cys1−Ospa前駆体の内部切断も検出された。 しかしながら、この場合、切断は、大量の分泌されたdes−Cys1−Ospaが、動物免疫に対する免疫原性効果の評価のために使用され得るような頻度で生じた。 これらの研究は、ライムボレリア症のためのワクチンとしてOspAの有用性の知識を拡張します。



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