MRSA検出

メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（MRSA）検出および同定方法

キーポイント

• グラム+ve coccus
• ブドウのような細胞のクラスター
• メチシリンおよび他のペニシリンに抵抗性
• また、ORSAと呼ばれることがあります

メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（MRSA）は、1960年代初頭に最初に報告され、現在は世界中の主要な病院取得病原体とみなされています。 メチシリン耐性という用語は、このクラスの抗菌剤のいずれかに対する耐性を記述するために歴史的に使用されています。 今日、アメリカでは約。 黄色ブドウ球菌の病院株の35％は、メチシリン（または他のペニシリン抗生物質）に耐性があり、近年、バンコマイシン耐性黄色ブドウ球菌（VRSA）の出現は、さら

抵抗性は、生物が変化したペニシリン結合タンパク質、Pbp2A（PBP2’としても知られている）と2mg/lのオキサシリンMICまたは4mg/lのメチシリンMICのいず

感染した患者と植民地化された患者は、病院と地域社会の両方でMRSAの貯水池であり、一般的に医療従事者との接触を介して伝達される。効果的で迅速な検査室診断および感受性試験は、MRSA感染の治療、管理および予防において重要である。

効果的で迅速な検査および感受性試験は、MRSA感染

検出技術

MRSAのための実験室のスクリーニングは、結果、感度、特異性とコストの速度の間の複雑なバランスです。

現在、スクリーニングの大部分はプレートベースの方法を使用して行われています。 調査では、この方法論グループが実行されたスクリーニングテストの>90%を占めていることが示唆されています。

しかし、ブロスベースの方法、発色培地、迅速なスクリーニングキット、分子アッセイおよび自動化されたシステムを含む代替方法の数は、ますます使用 スクリーニング綿棒からの分離は、非滅菌部位からの綿棒に存在する”汚染する”生物の数のために、長い手順になる可能性があります。

ブロスベースの濃縮培地は、一般的に感度を高めるために採用されています。 しかし、これは結果の速度を犠牲にしています。 NaClは、一般的にメチシリン、オキサシリン、セフォキシチンのいずれかと一緒にベースブロスに添加されます。 指標化合物はまた、ＭＲＳＡの存在の早期の指標を与えるために使用することもできる。固体寒天培地：固体寒天培地を用いたMRSAのスクリーニングおよび単離のための普遍的な標準化された方法はない。

固体寒天培地を用いたMRSAのスクリー 多くの選択的培地が利用可能であり、これらは選択を助けるためにＮａｃｌおよび／または抗生物質のような阻害剤に依存し、推定値を強調するためのｐＨ指 例は4mg/Lメチシリンまたは2mg/Lオキサシリンとの7%NaClを含んでいるマンニトールの塩の寒天です; 5.5%NaClおよび2mg/LオキサシリンのOxacillinの抵抗力があるスクリーニングの寒天;8mg/L ciprofloxacinのBaird Parker媒体;4%NaClおよび6mg/LオキサシリンのMueller Hintonの寒天。 24hrs孵化の感受性は頻繁に受諾可能な結果に必要な48hrs孵化と可変的である。

最近開発された発色培地は、コアグラーゼ陰性ブドウ球菌からの分化と一次成長と選択性を組み合わせています。 これらの媒体は従来の媒体と比較されたとき改善された特定性を示す。 感度も改善されますが、達成するためには48時間のインキュベーションが必要です>85％。

MRSAの検出に使用される分子方法の大部分は、黄色ブドウ球菌（nuc、fem）およびメチシリン耐性を検出するmecAに特異的な遺伝子を検出する多重化されたPCR ほとんどは純粋な文化との使用およびメチシリンの抵抗力がある遺伝子mecAを運ぶcoagulaseの否定的なブドウ球菌の存在による綿棒のないスクリーニングのた 新しい市販の増幅アッセイは、coagulaseなどの他の特定のマーカーと組み合わせてmecAを標的とし、有望な結果を示している

特にアデニル酸キナーゼ（AK）、ADPからATPを産生 AK測定はATPベースのシステムよりも感度が高く、サンプル中の50個以上の生物を日常的に検出することができます。 初期の性能データは、従来のプレート培養法と同等の結果を示し、5時間以内に結果を提供します。

同定/確認

伝統的に黄色ブドウ球菌の確認は、スライド-コアグラーゼ試験（凝集因子）およびチューブ-コアグラーゼ試験（遊離コアグラーゼ）を用いて行われる。 スライドのcoagulaseテストの陽性は管のcoagulaseテストと確認されるべきです。 DNase媒体の版はまた使用することができるが、陽性は付加的な確認を要求する。

凝集キットは広く入手可能であり、MRSAのいくつかの株は、これらのタンパク質の低レベルを持っているが、タンパク質Aと凝集因子を検出すること より新しいキットはまた表面の抗原の検出によって今働きます。 他の乳液のキットは細胞膜の内で起こり、検出のために細胞の換散を要求するPbp2Aを検出する。

商業生化学的なキットの広い範囲は手動および自動化されて利用できます。 これらはデータベース/テーブルに対して査定されるプロフィールを与える生化学的なテストの配列に基づいている。 多くの自動化されたシステムはMRSAの確認のための抗生の感受性のパネルと黄色ブドウ球菌の生化学的な同一証明を結合する。

抗生物質感受性法

メチシリンおよびオキサシリン感受性試験の方法は広範であり、公表されたデータは推奨事項に関して矛盾している。すべてのMRSA株に適した単一の方法はありません。

標準的な方法は、イギリス社会のための抗菌化学療法(BSAC）は、米国での臨床検査基準研究所(CLSI),従来知られているとしてNCCLS.

希釈法による最小阻害濃度は、伝統的に基準法となっている。

BSACは、2％NaClおよび104cfu/ml接種物を30℃でインキュベートしたミューラー-ヒントンまたはコロンビア寒天の使用を推奨します。CLSIは、2％NaClおよび104cfu/ml接種物を33-35℃でインキュベートしたミューラー-ヒントン寒天を推奨します。

mecA遺伝子を検出する分子方法は、参照方法としてMICを置き換えている。

ディスク拡散法を用いた抗生物質感受性試験は依然として最も広く使用されているが、結果は培地、NaCl濃度、温度、接種物および試験剤を含む様々な

セフォキシチンディスク拡散法を用いた最近の研究の数は、オキサシリンよりも高い信頼性を示唆している。 特別な媒体か孵化の温度は要求されないし、テストはpenicillinaseの超生産者によってより少なく影響されます。

最新のCLSIサプリメント（M100-S14）は、オキサシリンに対する黄色ブドウ球菌の耐性を示すように、<=19mmのブレークポイントを使用して30μ gのセフォキシチンディスクの使用を示唆している。 他の媒体ベースの方法には、寒天、ブロスベースのブレークポイント法（2mg/Lオキサシリン、4mg/Lメチシリン）、およびCLSI（承認された標準M7-A6）によって推奨される寒天スクリーニング法が含まれる。

MRSAは、もはや病院で獲得された感染症ではありませんが、これは主な感染源です。ますますMRSAは、コミュニティで、実際にペットから取得することができます。

これはおそらく潜在的に大きな宿主集団のためにより心配な傾向であり、抗生物質がいつどのように使用されるかの有意に増加した制御の必要性を強調している。

臨床的に重要な用途以外の抗生物質の広範な送達は、より高いレベルの抗生物質に抵抗性のある生物のさらなる選択につながるだけである。

定義：エスカペ病原菌とは何ですか？

多くの場合、”スーパーバグ”としてメディアで呼ばれる、エスカペ病原体（Enterococcus faecium、黄色ブドウ球菌、klebsiella pneumoniae、Acinetobacter baumannii、緑膿菌、Enterobacter spp。）は、世界的に病院で取得された感染症の主要な原因であると考えられています。

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