Proteína recombinante de superficie externa A (des – Cys1-OspA) de la espiroqueta de la enfermedad de Lyme Borrelia burgdorferi: altos niveles de producción en cultivos de levadura Saccharomyces cerevisiae

La proteína recombinante de superficie externa A con una la forma truncada (des-Cys1-OspA) de la espiroqueta de la enfermedad de Lyme Borrelia burgdorferi se expresó en Saccharomyces cerevisiae a altos niveles de producción. Dado que el candidato a vacuna recombinante expresado en Escherichia coli presenta bajos rendimientos de producción y la purificación de lipoproteínas parece ser difícil, hemos investigado la secreción de una OspA recombinante soluble en la levadura S. cerevisiae. De esta manera, se utilizó un derivado Leu+ de S. cerevisiae cI3ABYS86 como cepa huésped transformada con un plásmido de expresión que contenía el gen codificador des-Cys1-OspA e impulsado por el promotor alfa 1 de MF. Los resultados del cultivo por lotes con alimento revelaron que se obtiene una secreción eficiente de des-Cys1-OspA con un alto nivel de producción de aproximadamente 2.1 g l-1 con una densidad celular de 101 g l-1 de peso seco celular. La acumulación de proteína recombinante en el sobrenadante supera el 6% del total de proteínas de levadura cuando se estima mediante electroforesis en gel de dodecil sulfato de sodio/poliacrilamida. Además, des-Cys1-OspA mostró solubilidades más bajas a altas densidades celulares y, como consecuencia, se precipitó una fracción de la proteína recombinante. También se detectó una escisión interna del precursor MF alpha 1 pro::des-Cys1-OspA. Sin embargo, en este caso, la escisión se produjo con una frecuencia tal que las grandes cantidades de des-Cys1-OspA secretadas podrían emplearse para la evaluación de un efecto inmunogénico en la inmunización animal. Estos estudios ampliarán el conocimiento de la utilidad de la OspA como vacuna para la borreliosis de Lyme.