wpływ dwóch probiotycznych zarodników gatunków Bacillus na parametry hematologiczne, biochemiczne i zapalne u szczurów zakażonych salmonellą Typhimurium

wyliczenie salmonelli

aby dowiedzieć się, jak B. subtilis I B. coagulans wpływają na liczbę salmonelli w przewodzie pokarmowym i jej infiltrację do narządów docelowych, liczba S. Typhimurium w wątrobie, śledzionie,węzłach chłonnych krezki, kale oraz zawartość jelita krętego i jelita ślepego liczono w dniach 1, 3, 5 i 7 po podaniu salmonelli przez zgłębnik. Wyniki przedstawiono szczegółowo w tabelach 1 i 2. We wszystkich dniach pobierania próbek nie wyizolowano salmonelli z ślepych grup kontrolnych i probiotycznych grup kontrolnych. W pierwszym dniu pobierania próbek, poprzez bezpośrednie poszycie, Liczba salmonelli w wątrobie, śledzionie i węzłach chłonnych krezki we wszystkich czterech badanych grupach wynosiła zero. Ale stosując selektywne wzbogacanie, węzły chłonne czterech szczurów i wątroba jednego szczura z grupy Salmonella oraz węzły chłonne jednego szczura z grupy probiotycznej+Salmonella wykazały obecność salmonelli. W trzecim, piątym i siódmym dniu po zgłębniku stwierdzono obecność salmonelli w wątrobie, śledzionie i węzłach chłonnych grup Salmonella i Probiotyk + Salmonella. Wyniki pokazują, że liczba salmonelli jest większa w węzłach chłonnych niż w wątrobie i śledzionie (P < 0,05). Stosując probiotyki, liczba salmonelli w wątrobie, śledzionie i węzłach chłonnych krezki została znacząco zmniejszona we wszystkich trzech dniach pobierania próbek(P < 0,05); ponadto wyniki pokazują, że z czasem tendencja redukcji salmonelli wzrosła. Liczba salmonelli wydalanych w jelicie krętym, jelicie ślepym i Kale wzrosła do 5 dnia po zgłębniku i ponownie zmniejszyła się w 7 dniu, co było podobne w grupach Salmonella i Probiotyk + Salmonella. Jednak liczba salmonelli w jelicie krętym (P <0,05), jelicie ślepym (p < 0.05), a kał w grupie probiotycznej + Salmonella był mniejszy niż w grupie Salmonella od pierwszego dnia pobierania próbek.

współczynnik korelacji między liczbą salmonelli w jelicie krętym, jelicie ślepym i kale z liczbą salmonelli w wątrobie wynosił odpowiednio 0,67, 0,54 i 0,69; w śledzionie 0,72, 0,83 i 0,71; a w węzłach chłonnych krezki odpowiednio 0,72, 0,78 i 0,66 (p < 0.05).

Jak pokazują wyniki, probiotyki B. subtilis I B. koagulany nie hamowały całkowicie infiltracji salmonelli do węzłów chłonnych, ale powodowały opóźnioną infiltrację salmonelli do węzłów chłonnych, a w konsekwencji do śledziony i wątroby. Dodatkowo probiotyki przyspieszają delecję tego patogenu w zakażonej grupie. Jak wykazały wcześniejsze badania, probiotyki mają korzystny wpływ na zapobieganie kolonizacji patogennych bakterii w przewodzie pokarmowym, konkurencję o składniki odżywcze i receptory adhezyjne oraz stymulację odporności gospodarzy20,21. Ponieważ liczba salmonelli była na najwyższym poziomie W 5 dniu po zgłodnieniu i różnice między tymi dwiema grupami, można powiedzieć, że B. subtilis I B. coagulans zmniejszają kolonizację i inwazję S. Typhimurium. Vila et al. (2009) wykazał również, że B. cereus var. toyoi zmniejszył kolonizację i inwazję S. Entritidis w broiler22. La Ragione i Woodward (2003) wykazali, że podawanie B. subtilis jeszcze jeden dzień przed otrzymaniem S. Entertidis zmniejszyło liczbę salmonelli w wątrobie, śledzionie, jelicie czczym, jelicie krętym, okrężnicy i jelicie ślepym. Liczba S. Enteritidis odzyskane z caeca piskląt, które otrzymały wcześniejszą dawkę zarodników B. subtilis, było znacznie niższe niż grupa kontrolna, która nie otrzymała B. subtilis12. Feng i in. (2016) wykazały, że Lactobacillus plantarum PZ01, Lactobacillus salivarius JM32 i Pediococcus acidilactici JH231 zmniejszyły liczbę salmonelli w treści jelitowej, śledzionie i wątrobie podczas zakażenia salmonellą u kurcząt brojlerów 5. Poza tym, Barba-Vidal et al. (2017) wykazały, że podawanie Bifidobacterium longum subsp. infantis CECT 7210 i Bifidobacterium animalis subsp. lactis BPL6 w modelu odsadzenia prosiąt nie był w stanie zapobiec zakażeniu salmonellą, ponieważ większość z nich wystąpiła w kale dzień po wyzwaniu. Pomimo tego, probiotyk był w stanie zmniejszyć obciążenie patogenów w okrężnicy i kale, co sugeruje, że połączenie bifidobakterii może wykluczyć Salmonella23.

parametry hematologiczne

wyniki wykazały, że procent hematokrytu (PCV), liczba krwinek czerwonych (RBC) (do 5 dnia) i stężenie hemoglobiny (Hb) (do 3 dnia) były większe w grupie salmonelli niż w pozostałych grupach (P < 0,05). Podczas gdy wartości te powróciły do normalnego zakresu w dniu 7 (Tabela 3). Te przyrosty były wynikiem ciężkiego odwodnienia w grupie salmonelli, które wystąpiło z powodu biegunki22. W grupie salmonelli stolec był luźniejszy niż ślepa grupa kontrolna przez 3 dni po zgłębniku. Wcześniejsze badania wykazały, że Salmonella Typhimurium zwiększa ilość HB, PCV i RBC prosiąt23 i calves24. W grupie salmonelli liczba RBC wykazywała tendencję spadkową od pierwszego do siódmego dnia zakażenia (P < 0,05). Jednak w grupie probiotycznej+Salmonella nie stwierdzono wzrostu PCV, liczby RBC i stężenia Hb, a parametry te były podobne do ślepej grupy kontrolnej. W grupie probiotyków+Salmonella Salmonella wykazywała mniejszą patogenność ze względu na obecność aktywnych probiotyków, które zapobiegały kolonizacji salmonelli i konkurowały o składniki odżywcze i receptory adhezyjne 20,21.

wyniki wskazują, że nie zaobserwowano istotnej różnicy w liczbie płytek krwi (P> 0, 05) (dane nie zostały przedstawione).

liczba białych krwinek (WBC) i neutrofilów w grupie salmonelli była znacząco wyższa niż w pozostałych grupach od pierwszego dnia po podaniu. Liczba WBC i neutrofili zwiększała się w ciągu trzech dni zakażenia, a następnie zaczęła zmniejszać się od 5. dnia. Stosowanie probiotyków przed podaniem salmonelli zmniejszyło tendencję wzrostową poziomu WBC i neutrofili i ostatecznie zwiększyło poziom tych dwóch wskaźników do normalnego zakresu do dnia 5. W dniu 7 nie stwierdzono istotnych różnic w liczbie WBC i neutrofilów pomiędzy grupami Salmonella i Probiotyk + Salmonella (P > 0,05). Liczby te były większe niż grupy kontrolne ślepej próby i grupy kontrolne probiotyczne(Tabela 4).

wprowadzenie salmonelli znacznie zwiększyło liczbę limfocytów w porównaniu do ślepej grupy kontrolnej (P< 0,05). Stosując probiotyki przed podaniem salmonelli, znacznie zmniejszono tendencję wzrostową limfocytów (P < 0,05). Wyniki te były prawdziwe od 1 do 5 dni, ale w 5 dniu nie zaobserwowano znaczącej różnicy między grupami Salmonella i probiotycznymi + Salmonella (P > 0,05). W 7. dniu liczba limfocytów w grupie probiotycznej+Salmonella powróciła do wartości prawidłowych i nie stwierdzono różnic w poziomach w porównaniu do ślepej grupy kontrolnej. Jednak w grupie Salmonellalnej stwierdzono większy poziom limfocytów w porównaniu z pozostałymi trzema grupami (P < 0,05) (Tabela 4).

nie zaobserwowano istotnych różnic w stężeniu monocytów, eozynofilów i bazofilów w czterech leczonych grupach (P> 0,05) (dane nie zostały przedstawione).

współczynnik korelacji między liczbą salmonelli w jelicie krętym, jelicie ślepym, kale, wątrobie, śledzionie i węzłach chłonnych krezki z liczbą WBC wynosił 0,32, 0,36, 0,30, 0,33 i 0,47 oraz 0,48; neutrofile wynosiły 0,26, 0,32, 0,24, 0,29, 0,47 i 0,47; a limfocyty wynosiły 0,32, 0,36, 0,30, odpowiednio 0, 30, 0, 44 i 0, 45 (p < 0, 05).

w tym badaniu doświadczalnym liczba WBC w grupie salmonelli była znacznie większa niż w innych grupach od pierwszego dnia po zgłębniku ze względu na wzrost liczby neutrofili i limfocytów. Potwierdzono to również wcześniej, że Salmonella wywołała neutrofile, a wzrost limfocytów spowodował wzrost liczby WBC 24,25. Ponadto wzrostowi liczby salmonelli w jelicie krętym, jelicie ślepym, kale, wątrobie, śledzionie i węzłach chłonnych krezki towarzyszył wzrost liczby WBC, neutrofili i limfocytów (P < 0,05). Jednak w grupie probiotycznej+Salmonella poziomy te wzrosły po pewnym czasie. Wyniki te wskazywałyby, że B. subtilis I B. coagulans zmniejszają działanie S. Typhimurium. Dodatkowo, w grupie Probiotyk+Salmonella, powikłania S. Typhimurium są widoczne w krótszym okresie czasu, a zmiany powracają do normy szybciej niż w grupie Salmonella. Havelaar et al. (2001) wykazał, że S. Enteritidis u szczurów powoduje wykrywalne zmiany w liczbie neutrofili po podaniu dawki 104 JTK w górę, a po pięciu dniach obserwowano znaczne zwiększenie stężenia WBC i neutrofili. Wyniki te wykazały, że wszystkie typy leukocytów, z wyjątkiem eozynofilów, mają dodatni związek z dawką26.

parametry biochemiczne

nie stwierdzono znaczącej różnicy w parametrach biochemicznych pomiędzy ślepą próbą kontrolną a grupami kontrolnymi probiotycznymi (P> 0,05). Zakażenie salmonellą zwiększyło całkowitą ilość białka i globuliny we krwi (P < 0,05), ale nie miało znaczącego wpływu na albuminę surowicy krwi (p > 0,05). Spożycie probiotyków w grupie salmonelli, znacząco obniżyło całkowity poziom białka i globuliny (P < 0.05) i zbliżył te poziomy do wartości kontrolnych(Tabela 5). Ilość globuliny i białka całkowitego w 1., 3. i 5. dniu była znacząco wyższa w grupie Salmonella w porównaniu do grupy probiotycznej+Salmonella i obie były wyższe niż ślepa grupa kontrolna. W 7 dniu z grupą probiotyczną + Salmonella ilość globuliny i białka całkowitego była podobna do ślepej grupy kontrolnej. Doustna inokulacja salmonelli stymuluje odpowiedź immunologiczną, w tym humoralną i komórkową, co zwiększa poziom immunoglobuliny w surowicy i prowadzi do wzrostu całkowitej białki27. Jak pokazują wyniki, nie zaobserwowano różnic w ilości albumin w poszczególnych grupach. Dlatego zmiany w całkowitym białku są spowodowane zmianą ilości poziomów globin. Wzrostowi liczby salmonelli w wątrobie, śledzionie i węzłach chłonnych krezki towarzyszyła globulina w surowicy i wzrost całkowitego białka (P < 0,05). Współczynnik korelacji pomiędzy liczbą salmonelli w wątrobie, śledzionie i węzłach chłonnych krezki z ilością białka całkowitego we krwi wynosił odpowiednio 0,25, 0,28 i 0,35; globuliny odpowiednio 0,25, 0,35 i 0,43. B. subtilis I B. coagulans zmniejszają poziom globuliny, a także całkowity poziom białka w porównaniu do grupy salmonelli. Wskazuje to, że B. subtilis I B. coagulans zmniejszają patogenne działanie S. Typhimurium. Abudabos et al. (2016) wykazał, że Bacillus jako probiotyk nie miał wpływu na całkowity poziom białka, globuliny i albumin. Po wystawieniu na działanie salmonelli probiotyki hamują zmniejszenie stężenia albumin i zwiększenie stężenia globuliny, co prowadzi do pozytywnej kontroli Salmonella28.

nie stwierdzono istotnej różnicy w ilości fosfatazy alkalicznej (ALP) między czterema grupami w dniach pobierania próbek (P> 0,05) (dane nie zostały pokazane). Nie zaobserwowano istotnych różnic w ilości aminotransferazy alaninowej (AlAT) i aminotransferazy asparaginianowej (AspAT) w czterech grupach do 5.dnia pobierania próbek (P > 0,05), podczas gdy w 7. dniu Salmonella spowodowała znaczny wzrost aktywności AlAT i AspAT (p < 0,05). Spożycie probiotyków utrzymywało poziom tych dwóch enzymów w normalnym zakresie przez cały okres pobierania próbek(Tabela 6). Zwiększenie aktywności AlAT i AspAT w 7. dniu po podaniu doustnym w grupie salmonelli wskazuje na stan zapalny i uszkodzenie wątroby29. Jednak w grupie probiotyków + Salmonella nie zaobserwowano wzrostu, co oznacza, że B. subtilis I B. coagulans hamują patogenne działanie S. Typhimurium i zapalenie wątroby. Również mniejsze zmiany czynnika wątrobowego w grupie probiotycznej + Salmonella wynikają z mniejszej liczby salmonelli w tej grupie w porównaniu do grupy Salmonella.

podczas infekcji S. Typhimurium rozprzestrzenia się systemowo z plastrów Peyera do wątroby i śledziony, gdzie nadal rośnie w obrębie makrofagów30, 31. Glikoliza jest niezbędna do replikacji wewnątrzkomórkowej i przeżycia S. Typhimurium w makrofagach32. Obniżenie poziomu glukozy może wynikać z większego wychwytu glukozy we krwi, gdy metabolizm reaguje na zakażenie Salmonellą23. W grupie Salmonella stężenie glukozy wzrastało w 1. i 3. dniu po zaszczepieniu (Tabela 6), ale utrzymywało się w normie w grupie Probiotyk + Salmonella, co oznacza, że B. subtilis I B. coagulans zmniejszają działanie salmonelli. Wzrostowi liczby salmonelli w jelicie krętym, jelicie ślepym, kale, wątrobie i śledzionie towarzyszyło zmniejszenie stężenia glukozy w surowicy (P < 0,05). Współczynnik korelacji między liczbą salmonelli w jelicie krętym, jelicie ślepym, kale, wątrobie i śledzionie z glukozą w surowicy wynosił -0,28, -0,31, -0,26, -0,22 i -0.22 w kolejności (P < 0.05).

zakażenie salmonellą znacznie zwiększyło poziom dehydrogenazy mleczanowej (LDH) (P < 0,05). LDH jest rozpoznawany jako marker toksyczności komórek, a mniejsza ilość wskazuje na mniejsze uszkodzenia komórkowe33. Stosowanie probiotyków u szczurów zakażonych salmonellą prowadziło do mniejszego przyrostu poziomu LDH, jednak był on nadal wyższy niż ślepa próba kontrolna i grupy kontrolne probiotyczne (P < 0,05) (Tabela 7). Oznacza to, że B. subtilis I B. koagulany zmniejszają uszkodzenia komórek spowodowane przez salmonellę. Wzrostowi liczby salmonelli w jelicie krętym, jelicie ślepym, kale, wątrobie, śledzionie i węzłach chłonnych krezki towarzyszył wzrost LDH (P < 0,05).

w grupie salmonelli poziom kreatyny wzrósł od 5 dnia podawania. Ten sam trend zaobserwowano w Azocie mocznikowym we krwi (BUN) w 5. i 7. dniu pobierania próbek, co wskazywało na dysfunkcję nerek. Został również wymieniony przez Doorna et al. (2006) że w zakażeniu salmonellą wystąpiła dysfunkcja nerek, co powoduje wzrost BNU i kreatyniny 34. W grupie probiotycznej+Salmonella ilość kreatyny i bułki była podobna do ślepej próby kontrolnej i grupy kontrolnej probiotycznej (P > 0,05) we wszystkich dniach pobierania próbek (Tabela 7). Wskazuje to, że B. subtilis I B. coagulans hamują patogenny wpływ S. Typhimurium na nerki.

wzrostowi liczby salmonelli w wątrobie, śledzionie i węzłach chłonnych krezki towarzyszył wzrost BUN i kreatyny (P< 0,05). Współczynnik korelacji pomiędzy liczbą salmonelli w wątrobie, śledzionie i węzłach chłonnych krezki z ilością kreatyny wynosił odpowiednio 0,28, 0,40 i 0,45, a BUN odpowiednio 0,41, 0,59 i 0,53 (P < 0,05).

poziom całkowitego żelaza w grupie salmonelli znacznie wzrósł w dniach 1, 3 i 5, a następnie powrócił do normy w 7 dniu. S. Typhimurium wydziela siderofory do wiązania się z żelazem35. Jednakże stosowanie probiotyków utrzymywało całkowity poziom żelaza we krwi w prawidłowym zakresie we wszystkich dniach pobierania próbek(Tabela 7). W grupie Probiotyk + Salmonella był wyższy już w pierwszym dniu i powrócił do normy po tym. Sugerowałoby to jednak, że Salmonella powoduje wzrost ilości żelaza w surowicy, ale probiotyki hamują ten mechanizm. Geith et al. (2015) odnotowano korzystną rolę Lactobacillus acidophilus w modyfikacji parametrów ostrej fazy, takich jak zmniejszenie fibrynogenu, ESR, TIBC (całkowita zdolność wiązania żelaza), UIBC (nienasycona zdolność wiązania żelaza) i ceruloplazminy, a z drugiej strony zwiększono procent nasycenia albuminą, całkowitym białkiem, żelazem i transferryną podczas zakażenia S. Typhimurium u szczurów albinosów4.

oznaczanie mediatorów zapalnych

poziom mediatorów zapalnych, w tym TNF-α, amyloidu a w surowicy (SAA) i IL-10 w probiotycznej grupie kontrolnej i ślepej grupie kontrolnej był podobny (P> 0,05). Zakażenie salmonellą znacznie zwiększyło poziom TNF-α i SAA we wszystkich dniach pobierania próbek (P < 0,05). W grupie probiotycznej+Salmonella poziom tych dwóch mediatorów zapalnych znacznie się zmniejszył w porównaniu z grupą Salmonella (P < 0.05), ale nadal była wyższa niż ślepa grupa kontrolna i grupa kontrolna probiotyczna (p < 0,05) (Fig. 1 i 2).

ilość TNF-α (pg / ml) w próbkach surowicy szczurów poddanych różnym zabiegom w ciągu 1, 3, 5 i 7 dni po podaniu przez zgłębnik salmonelli. Wartości są średnie z 5 niezależnych replikatów. Ślepa grupa kontrolna: otrzymująca wodę; probiotyczna grupa kontrolna: otrzymująca wodę zawierającą 5 × 107 zarodników / ml B. subtilis i 5 × 107 zarodników / ml B. coagulans; Grupa Salmonella: przyjmująca wodę i zgłębnik do żołądka 1 × 109 CFU S. Typhimurium; Grupa probiotyczna+Salmonella: przyjmująca wodę zawierającą 5 × 107 zarodników/ml B. subtilis i 5 × 107 zarodników/ml B. coagulans oraz zgłębnik do żołądka 1 × 109 CFU S. Typhimurium. Linia ślepej kontroli i probiotycznych grup kontrolnych są pokrywane. Różne litery wskazują istotne różnice między grupami w każdym dniu (P < 0.05).

ilość surowicy amyloidu a (µg/ml) w próbkach surowicy szczurów z różnymi metodami leczenia w 1, 3, 5 i 7 dni po podaniu salmonelli. Wartości są średnie z 5 niezależnych replikatów. Ślepa grupa kontrolna: otrzymująca wodę; probiotyczna grupa kontrolna: otrzymująca wodę zawierającą 5 × 107 zarodników / ml B. subtilis i 5 × 107 zarodników / ml B. coagulans; Grupa Salmonella: Otrzymywanie wody i zgłębnika do żołądka 1×109 CFU S. Typhimurium; Grupa probiotyczna+Salmonella: otrzymywanie wody zawierającej 5 × 107 zarodników/ml B. subtilis i 5 × 107 zarodników/ml B. coagulans oraz zgłębnika do żołądka 1 × 109 CFU S. Typhimurium. Linia ślepej kontroli i probiotycznych grup kontrolnych są pokrywane. Różne litery wskazują istotne różnice między grupami w każdym dniu (P < 0.05).

zakażenie salmonellą znacznie zwiększyło poziom IL-10 we wszystkich dniach w porównaniu do ślepej grupy kontrolnej (P< 0,05), podczas gdy spożycie probiotyków zapobiega wzrostowi poziomu IL-10 do trzeciego dnia po podaniu salmonelli. Jednak w dniu 5 poziom IL-10 znacznie wzrósł i ponownie zmniejszył się w siódmym dniu w porównaniu do ślepej grupy kontrolnej (Fig . 3). Współczynnik korelacji między liczbą salmonelli w jelicie krętym, jelicie ślepym, kale, wątrobie, śledzionie i krezkowych węzłach chłonnych z poziomem TNF-α wynosił 0,39, 0,41, 0,37, 0,46, 0,61 i 0,62; z poziomem SAA wynosił 0,39, 0,43, 0,37, 0,43, 0,64 i 0,61; a z poziomem IL-10 wynosił 0,43, 0,51, 0,41, 0,34, 0,56 i 0,59 odpowiednio (p < 0,05).

ilość IL-10 (pg / ml) w próbkach surowicy szczurów poddanych różnym zabiegom w ciągu 1, 3, 5 i 7 dni po podaniu przez zgłębnik salmonelli. Wartości są średnie z 5 niezależnych replikatów. Ślepa grupa kontrolna: otrzymywanie wody; probiotyczna grupa kontrolna: otrzymywanie wody zawierającej 5 × 107 zarodników / ml B. subtilis i 5 × 107 zarodników / ml B. coagulans; Grupa Salmonella: otrzymywanie wody i zgłębnika żołądkowego 1 × 109 CFU S. Typhimurium; Grupa probiotyczna + Salmonella: Otrzymujący wodę zawierającą 5 × 107 zarodników/ml B. subtilis i 5 × 107 zarodników / ml B. coagulans oraz zgłębnik śródgastrowy 1 × 109 CFU S. Typhimurium. Różne litery wskazują istotne różnice między grupami w każdym dniu (P < 0.05).

zakażenie układowe i kolonizacja bakteryjna w jelitach indukują białka SAA w wątrobie36. TNF-α jest wytwarzany na wczesnym etapie odpowiedzi na lipopolisacharyd (LPS) i uważa się, że jest głównym mediatorem zróżnicowanej odpowiedzi patofizjologicznej na LPS37. Ponadto IL-10 działa jako niezbędna cząsteczka umożliwiająca zakażenie S. Typhimurium poprzez redukcję rozpuszczalnych determinantów zapalnych, które mogą aktywować zarówno wrodzone, jak i adaptacyjne odpowiedzi immunologiczne, które ograniczają rozprzestrzenianie się S. Typhimurium 38. W obecnym badaniu S. Typhimurium spowodował wzrost IL – 10, TNF-α i SAA, ale B. subtilis i B. coagulans obniżają te parametry. Te probiotyki zmniejszają liczbę salmonelli w jelicie i hamują kolonizację tego patogenu. Ponadto obserwuje się niższe poziomy LPS, co powoduje, że SAA, TNF-α i IL-10 wykazują mniejsze zmiany w porównaniu z grupą salmonelli. Zmniejszeniu liczby salmonelli w jelicie krętym, jelicie ślepym,kale, wątrobie, śledzionie i węzłach chłonnych krezki towarzyszyło zmniejszenie SAA, TNF-α i IL-10 (P < 0,05). Feng i in. (2016) wykazały, że Lactobacillus plantarum PZ01, Lactobacillus salivarius JM32 i Pediococcus acidilactici JH231 obniżyły poziom czynnika TNF-α indukowanego lipopolisacharydami (LITAF), IL-1β, IL-6 i IL-12 w surowicy i zwiększyły poziom IL-10 w surowicy podczas zakażenia salmonellą u kurcząt brojlerów 5.

Całkowita pojemność antyoksydacyjna (TAC)

zakażenie salmonellą znacznie zmniejszyło ilość Tac (p < 0,05), podczas gdy stosowanie probiotyków podczas ekspozycji na salmonellę zwiększyło TAC (p < 0,05) (rys. 4). Współczynnik korelacji między liczbą salmonelli w jelicie krętym, jelicie ślepym, kale, wątrobie, śledzionie i węzłach chłonnych krezki z ilością TAC wynosił kolejno -0,36, -0,37, -0,34, -0,39, -0,43 i -0,48 (P < 0,05).

ilość całkowitej zdolności antyoksydacyjnej (TAC) (mM/L) w próbkach surowicy szczurów poddanych różnym zabiegom w ciągu 1, 3, 5 i 7 dni po salmonella. Wartości są średnie z 5 niezależnych replikatów. Ślepa grupa kontrolna: Woda przyjmująca; grupa kontrolna probiotyczna: woda przyjmująca zawierająca 5 × 107 zarodników/ml B. subtilis i 5 × 107 zarodników/ml B. coagulans; Grupa Salmonella: woda przyjmująca i zgłębnik do żołądka 1 × 109 CFU S. Typhimurium; Grupa probiotyczna+Salmonella: woda przyjmująca zawierająca 5 × 107 zarodników/ml B. subtilis i 5 × 107 zarodników/ml B. coagulans i zgłębnik do żołądka 1 × 109 CFU S. Typhimurium; Grupa probiotyczna + Salmonella: woda przyjmująca zawierająca 5 × 107 zarodników / ml B. subtilis i 5 × 107 zarodników / ml B. coagulans i zgłębnik do żołądka 1 × 109 CFU S. Typhimurium S. typhimurium. Różne litery wskazują istotne różnice między grupami w każdym dniu (P < 0.05).

podczas procesów zapalnych aktywacja fagocytów i produkty bakteryjne wzmacniają wieloskładnikową oksydazę flawoproteinową NADPH, która katalizuje wytwarzanie dużych ilości rodników anionów ponadtlenkowych. W rezultacie organizm wymaga odpowiedniego poziomu przeciwutleniacza, aby uniknąć szkodliwych skutków reaktywnych form tlenu. Dlatego przeciwutleniacze są niezbędne do regulacji reakcji uwalniających wolne rodniki39. S. Typhimurium wzmaga stres oksydacyjny. LPS S. Typhimurium może indukować wytwarzanie H2O2 i jednocześnie zmniejszać TAC40. W badaniu tym TAC zmniejszył się bardziej w grupie Salmonella niż w grupie probiotycznej + Salmonella. Wzrostowi liczby salmonelli w jelicie krętym, jelicie ślepym, kale, wątrobie, śledzionie i węzłach chłonnych krezki towarzyszyło zmniejszenie TAC (P < 0,05). Pokazuje to, że probiotyki zmniejszają destrukcyjne skutki stresu wywołanego salmonellą. Ponadto B. subtilis I B. coagulans jako probiotyki powodują wzrost ilości TAC w porównaniu do ślepej grupy kontrolnej. Tak więc te probiotyki przygotowują organizm do ekspozycji na patogen i stres, który jest przez nich spowodowany.

pomiar malondialdehydu (MDA)

ilość MDA w okresie pobierania próbek była wyższa w grupach Salmonella i Probiotyk+Salmonella w porównaniu do ślepej próby kontrolnej i probiotycznych grup kontrolnych. Stosowanie probiotyków podczas zakażenia salmonellą zmniejszyło MDA, ale redukcja nie była znacząca (P > 0,05). Zawartość MDA w probiotycznej grupie kontrolnej była podobna do ślepej grupy kontrolnej (Fig. 5).

ilość malondialdehydu (MDA) (mM/L) w próbkach surowicy szczurów poddanych różnym zabiegom w ciągu 1, 3, 5 i 7 dni po salmonella. Wartości są średnie z 5 niezależnych replikatów. Ślepa grupa kontrolna: otrzymująca wodę; probiotyczna grupa kontrolna: otrzymująca wodę zawierającą 5 × 107 zarodników / ml B. subtilis i 5 × 107 zarodników / ml B. coagulans; Grupa Salmonella: otrzymująca wodę i zgłębnik do żołądka 1 × 109 CFU S. Typhimurium; Grupa probiotyczna + Salmonella: otrzymująca wodę zawierającą 5 × 107 zarodników / ml B. subtilis i 5 × 107 zarodników/ml B. coagulans oraz zgłębnik do żołądka 1 × 109 CFU S. Typhimurium. Różne litery wskazują istotne różnice między grupami w każdym dniu (P < 0.05).

współczynnik korelacji liczby salmonelli w węzłach chłonnych jelita krętego, jelita ślepego, kału, wątroby, śledziony i krezki z ilością MDA wynosił kolejno 0,32, 0,32, 0,31, 0,31, 0,47 i 0,53 (P < 0.05). Malondialdehyd jest najczęściej stosowanym biomarkerem peroksydacji lipidów i stresu oksydacyjnego w wielu problemach zdrowotnych41. MDA jest jednym z produktów, które zwiększyły się w chorobie salmonelli. MDA w grupie probiotycznej + Salmonella nie ma znaczącej różnicy w grupie Salmonella. Możemy stwierdzić, że B. subtilis I B. coagulans jako probiotyki nie wpływają na stężenie MDA. Jednak wyniki korelacji wykazały mniejszą liczbę salmonelli w jelicie krętym, jelicie ślepym, kale, wątrobie, śledzionie i węzłach chłonnych krezki, którym towarzyszyła mniejsza ilość MDA (P < 0,05).