A Influência dos Alimentos, a Matriz de Sistema de Entrega, sobre a Biodisponibilidade de Vitamina D3 (DFORT)

plano de FUNDO O projeto atual é uma parte da vitamina D fortificação com maior biodisponibilidade programa de estudo (sigla: DFORT) que é um projecto interdisciplinar, incluindo grupos de pesquisa da Dinamarca, a Espanha e a Holanda suportados pelo dinamarquês para a Inovação da Fundação. O objectivo geral da DFORT é desenvolver estratégias mais eficientes para a fortificação da vitamina D através do estudo da influência da matriz de administração na biodisponibilidade da vitamina D. A DFORT está organizada em quatro pacotes de trabalho científico (WP).

os dois primeiros WPs procuraram estudar se a formação complexa (nano-encapsulação) de vitamina D com diferentes proteínas pode aumentar a estabilidade da vitamina D (WP 1 de chumbo pelo prof. Daniel Otzen, AU-iNANO) e o efeito da formação complexa em sistemas alimentares reais, incluindo investigações sobre a estabilidade durante a armazenagem, a exposição à luz e ao calor (WP 2 liderado pelo professor associado Trine Kastrup Dalsgaard, AU – FOOD). WP 1+2 demonstraram que a vitamina D pode ser estabilizada por formação complexa com proteína de soro de leite e que a encapsulação pode causar uma degradação menos oxidativa, melhorando assim a estabilidade da vitamina D em diferentes sistemas alimentares.

no estudo em curso (WP 3 liderado pelo prof. Lars Rejnmark, AU-Health), a biodisponibilidade da vitamina D em diferentes matrizes alimentares (incluindo a formação complexa com proteína de soro de leite) será estudada no ser humano. As amostras biológicas serão colhidas em WP 3, permitindo estudos metabolómicos sobre possíveis associações entre a suplementação de vitamina D através de diferentes matrizes alimentares e fenótipo metabólico (WP 4, liderados pelo Prof. Hanne C. Bertram, AU-FOOD).

embora a maior parte da vitamina D corporal total seja sintetizada na pele após exposição à luz UV (comprimento de onda de 290-315 nm), a maioria dos indivíduos necessita pelo menos de alguma vitamina D dietética para manter o estado de vitamina D. Isto é especialmente verdadeiro durante o inverno. Com uma latitude de 56 ° N na Dinamarca, não existe síntese endógena de vitamina D nos meses que se estendem de outubro a abril, o que significa que os habitantes têm de depender de fontes de alimentos para manter um estatuto de vitamina D completo. O colecalciferol (vitamina D3 ) é a principal fonte alimentar de vitamina D, mas está presente apenas num número limitado de produtos alimentares (tais como peixes gordos), o que dificulta a obtenção da ingestão recomendada de 10 µg D3 por dia.

o estado da vitamina D pode ser melhorado em resposta a um aumento da ingestão de vitamina D em termos de suplementação com comprimidos ou fortificação de alimentos. Numerosos estudos demonstraram um aumento dos níveis de 25-hidroxi-vitamina D (25OHD) em resposta a um aumento da ingestão de vitamina D. presume-se geralmente que as concentrações médias de 25OHD aumentam 0.7 nmol / L em resposta a um aumento da ingestão a longo prazo de 1 µg de vitamina D por dia, embora o aumento relativo por Micrograma complementado possa ser mais elevado se os níveis basais forem baixos. Apesar desta conhecida relação dose-resposta em grupos de pessoas, vários estudos documentaram que a alteração nos níveis séricos de 25OHD em resposta à suplementação de vitamina D varia muito.

várias razões podem explicar a variação inter-individual na resposta à suplementação com vitamina D. Em termos brutos, a variação pode ser devido a dosagem imprecisões (inconsistências entre a reclamada e os valores reais de vitamina D) e variação na biodisponibilidade de vitamina D.

Desajustamentos entre a reclamada e os valores medidos de vitamina D, o conteúdo de vitamina D, tablets e alimentos fortificados produtos pode ser devido a inconsistências na dose utilizada para o enriquecimento ou a instabilidade da vitamina por si só. Resultados discrepantes têm sido relatados sobre a estabilidade da vitamina D em diferentes matrizes de alimentos e quando expostos a diferentes riscos fisioquímicos. Alguns investigadores relataram que a vitamina D é instável, enquanto outros descobriram que ela é notável estável quando exposta à oxidação, luz, e ao ácido e álcali.

apenas poucos estudos procuraram factores responsáveis pela variação inter-individual dos níveis de 25OHD em resposta à suplementação com vitamina D. Estes estudos sugeriram que a composição corporal (incluindo o teor de massa gorda), as variantes genéticas da proteína de ligação da vitamina D (VDBP) e a relação entre a vitamina D (24,25(OH)2D) e a 25OHD sérica podem contribuir para a variação dos níveis séricos de 25OHD. No entanto, num estudo recente, apenas 47% das variações na resposta à suplementação com vitamina D poderiam ser explicadas tendo em conta factores de importância conhecida para as alterações nos níveis de 25OHD.

para além dos índices acima mencionados, os factores de importância para a absorção intestinal da vitamina D, bem como a matriz alimentar através da qual é fornecida suplementação de vitamina D, podem contribuir para variações interindividuais nas respostas de 25OHD. No entanto, são poucos os estudos disponíveis sobre a biodisponibilidade da vitamina D A partir de diferentes matrizes alimentares e a absorção intestinal da vitamina D, incluindo o destino intraluminal, e os mecanismos moleculares que facilitam a absorção ainda são apenas parcialmente compreendidos.

Como a vitamina D é solúvel em gordura, molécula, tem sido geralmente assumido que a vitamina D é absorvida no intestino delgado por simples difusão passiva com vitamina D, sendo incorporados micelle e transportados pelos quilomícrons via linfáticos, veias para o fígado. Isto está em alinhamento com estudos que mostram um risco aumentado de baixos níveis de 25OHD em doentes com má absorção de gordura. Assim, tem sido sugerido que a ingestão de vitamina D com uma refeição rica em gordura pode aumentar a liberação de bile, permitindo uma maior incorporação de vitamina D na bile salt micelle, assim, melhorar a biodisponibilidade de vitamina D. no Entanto, resultados discrepantes foram relatados, se a composição das matrizes de alimentos (e o seu conteúdo em gordura) por que a vitamina D é ingerido influenciar a sua biodisponibilidade.

num ensaio aleatorizado e controlado por Raimundo et al. a alteração média dos níveis de 25OHD duas semanas após o tratamento com uma dose oral única grande de 50.000 UI D3 foi maior, quando a refeição teve pelo menos 15 g de gordura em comparação com uma refeição sem gordura. Em contrapartida, o teor de gordura do alimento matrizes não foi encontrado para influenciar o tempo de concentração de perfil medido pela vitamina D2 níveis no plasma 2, 4, 8, 12, 48, e 72 h após a ingestão de uma dose única de 25.000 UI D2 adicionado ao leite integral, leite desnatado ou dissolvidos em 0,1 mL de óleo de milho e aplicada para brinde. No entanto, ambos os estudos são limitados pela utilização de doses muito elevadas (farmacológicas) de vitamina D, que podem sobrepor-se a quaisquer efeitos fisiológicos da composição das matrizes alimentares.

a ausência de um efeito do teor de gordura do alimento pelo qual a vitamina D é ingerida é também apoiada por estudos sobre a fortificação da vitamina D do sumo de laranja. Comparar a biodisponibilidade da vitamina D adicionada ao suco de laranja ou suplementada, conforme cápsulas mostrou um aumento semelhante nas concentrações de 25OHD em resposta a 11 semanas de suplementação com 1000 UI de vitamina D por dia e o aumento foi significativo em comparação com o placebo. O facto de A vitamina D poder ser suficientemente absorvida na sequência de uma refeição sem gordura (como o sumo de laranja) pode ser explicado pelos recentes dados sobre o mecanismo pelo qual a vitamina D é absorvida. Parece que a vitamina D não é apenas absorvida por difusão passiva simples (por incorporação na micela), uma vez que os transportadores de membrana do colesterol, tais como SR-BI, CD36, ou NPC1L1, têm demonstrado estar envolvidos na absorção. Diferenças nos níveis de expressão e a existência de polimorfismos funcionais nos genes que codificam essas proteínas também podem contribuir para o grande inter-variação individual na pós-prandial respostas para a vitamina D.

Só muito poucos estudos estão disponíveis no perfil de concentração plasmática de vitamina D após a ingestão de uma dose oral. Denker et al. estudou o perfil farmacocinético da vitamina D3 após a administração de uma única D3 dose de 2800 ou 5600 UI, mostrando que o plasma D3 níveis aumentou de forma constante após a ingestão e atingiu um pico de 9±2.3 h com concentrações de voltar para perto de valores de linha de base por 72 h. Desconhece-se se a matriz alimentar (incluindo a formação complexa de vitamina D por encapsulação com proteínas de soro de leite) afecta a biodisponibilidade da vitamina D, avaliada pelos perfis de concentração plasmática-tempo, e se tal pode influenciar a variabilidade inter-individual em resposta à suplementação com vitamina D.

A importância da ingestão de cálcio, e, especialmente, a ingestão de cálcio a partir de produtos lácteos e tablets (suplementos) tem sido investigada em vários estudos mostrando resultados discrepantes. Uma meta-análise Cochrane sugeriu um efeito benéfico global do aumento da ingestão de cálcio de produtos lácteos e suplementos de cálcio. No entanto, um ensaio recente sugeriu um aumento da pressão arterial nas horas seguintes à ingestão de 1000 mg de citrato de cálcio em comparação com o placebo. Até à data, não foi investigado se a ingestão de leite provoca efeitos semelhantes nos índices de saúde cardiovascular, incluindo pressão arterial e rigidez arterial.

OBJETIVO O objetivo geral do estudo é investigar a influência de diferentes matrizes de alimentos (incluindo complexo de formação com proteínas de soro de leite) sobre a biodisponibilidade de vitamina D, como avaliado pelo número máximo de perfis de concentração (Cmax) e o tempo de concentração da curva de D3 no plasma e, assim, se inter-variação individual na absorção de vitamina D pode depender do sistema de entrega.

hipótese Co-primária (nula) :

• a matriz alimentar através da qual D3 é administrado não afecta a Cmax de D3, conforme determinado 10h após a administração.
• o perfil de absorção (curva de concentração do Tempo em termos de área sob a curva de 0h a 12h ) não difere de acordo com a matriz alimentar pela qual D3 é fornecido.hipóteses secundárias (null -)
  • em comparação com a vitamina D fornecida como gotas, a absorção de D3 não é aumentada pela administração através de cada uma das matrizes de alimentos testadas (i.e., Cmax aumentada).em comparação com a vitamina D adicionada ao sumo, a absorção de D3 não é potenciada pelo complexo proteico de soro de leite D3 (isto é, aumento da Cmax).os tratamentos não afectam os níveis plasmáticos da hormona paratiroideia (PTH) e do cálcio ionizado.
  • a variabilidade da suplementação de vitamina D em termos de Cmax é menor se a vitamina D Se liga de forma complexa às proteínas de soro de leite, em comparação com os outros métodos de suplementação testados.
  • a rigidez Arterial avaliada pela tonometria não é afectada pela ingestão de leite.hipóteses explicativas a fim de permitir investigações adicionais sobre os índices de importância para as respostas à suplementação de vitamina D, serão recolhidos dados sobre a composição corporal, polimorfismos genéticos, estado do colesterol e hábitos alimentares habituais.

    materiais e métodos

    concepção do estudo o estudo é realizado como um estudo transversal múltiplo utilizando um design equilibrado de quadrado latino. Esta concepção permite que cada participante funcione como seu próprio controlo, contrabalançando assim o risco de uma influência adversa nos resultados da ordem de tratamento ou outros factores, tais como o efeito do período, bem como variações interindividuais atribuíveis a, por exemplo, variações genéticas, peso corporal, etc. Por aleatorização, cada participante será alocado para receber todos os cinco regimes de tratamento em uma ordem pré-especificada com um período de 10-21 dias de lavagem entre cada um dos braços de tratamento.

    as sequências de tratamento são:

    Tratamento sequência 1: A B E C D

    Tratamento sequência 2: a B C D E

    Tratamento sequência 3: C D B E A

    Tratamento seqüência 4: D E C A B

    Tratamento seqüência 5: E A D B C

    Tratamento sequência 6: D C E B A

    Tratamento sequência de 7: E D A C B

    Tratamento sequência de 8: A E B D C

    Tratamento sequência de 9: B A C E D

    Tratamento sequência 10: C B D A E

    PROCEDIMENTOS PARA lidar com a SUPLEMENTAÇÃO com VITAMINA D, O suplemento vai ser adquiridos comercialmente e armazenada no Osteoporose Clínica, Aarhus University Hospital e mantidos longe de outros medicamentos e suplementação. O sub-investigador é responsável pelo manuseamento e distribuição correctos do suplemento de vitamina D, bem como pela Garantia de que o suplemento só será utilizado como descrito no protocolo e de que os participantes são instruídos a tomá-lo correcto.

    procedimentos para aleatorização randomização serão feitos usando uma lista de geração de computador. Os tratamentos não serão cegados para o investigador. Em termos de comparação de suco com ou sem complexos de proteínas de soro de leite, será aplicado um desenho único cego, uma vez que os participantes não serão informados quais dos tratamentos que estão recebendo. Cada sequência de tratamento será atribuída ao mesmo número de doentes – por exemplo, 3 participantes estarão na sequência de tratamento 1, 3 na sequência de tratamento 2 etc.

    população trinta participantes serão recrutados a partir da população de fundo geral, por correio directo, utilizando uma lista de indivíduos seleccionados aleatoriamente que vivem na área de Aarhus gerada por “serviços de investigação” no Statens Serum Institut. O estudo será realizado durante o inverno (novembro-abril).

    retirada e desistência qualquer participante pode, a qualquer momento, sair do estudo sem qualquer explicação e não terá de passar por um exame final. O investigador pode retirar um participante se tal se afigurar necessário para a sua segurança. Desistências e levantamentos serão anotados e explicados na CRF.

    Retirada vai acontecer no caso de um dos seguintes critérios são atendidos:

    • Alterar em vitamina D
    • cálcio Ionizado ≥1.40 mmol/L
    • Doença ou nova medicação que irá influenciar o estudo
    • adversos Graves efeitos/sintomas, que é esperado para ser causado por vitamina D, Doenças que ocorrem dentro de 7 dias de tratamentos pode ser uma possível causa da participação no estudo. Neste período de tempo, o sub-investigador pode ser contactado a fim de investigar se é uma causa da suplementação de vitamina D. No caso de ser, os sintomas ou doença serão seguidos até que seja curado ou se tornaram crônicos.

    exames os participantes serão examinados 5 vezes ao longo de um período de 6 a 12 semanas. Em cada visita, os participantes chegarão em jejum antes das 9 da manhã e permanecerão no departamento até que a colheita de sangue às 12 horas seja feita. Daqui em diante, os participantes são livres para ir para casa e voltar no dia seguinte para a colheita de sangue 24 horas e entregar as amostras de urina ou ficar a noite no hospital. Durante as 12 horas no Departamento, os participantes receberão comida padronizada.

    informações básicas sobre saúde e questionários:

    os participantes responderão aos questionários relativos à sua saúde geral, bem como aos hábitos alimentares e à exposição solar.

    Bioquímica:

    amostras de Sangue serão coletadas em diferentes pontos de tempo (0, 2, 4, 6, 8, 10, 12, e 24 horas).

    todas as medições serão realizadas quando todos os materiais de todos os 30 participantes tiverem sido recolhidos, a fim de evitar variações nos resultados. As amostras de sangue serão armazenadas num biobank por um período máximo de 15 anos após o final do estudo.

    amostras de Urina:

    Urina será recolhido em 3 lotes no primeiro dia de cada dosagem por exemplo, de 0 a 4 horas, de 4-8 horas e de 8-24 horas.

    todas as medições serão realizadas quando todos os materiais de todos os 30 participantes tiverem sido recolhidos.

    exames ósseos:

    absorvometria de raios X de Dupla Energia (DXA) e tomografia computadorizada periférica de alta resolução (HRpQCT):

    DXA scanning with the Halic QDR Discovery scanner. A densidade mineral óssea (DMO) será medida na coluna lombar (L1-L4), no colo do fémur e no antebraço distal. Além disso, determina – se a composição corporal total, incluindo a massa do tecido adiposo e magro.

    a HRpQCT bone scan of the distal radius and tíbia will be performed using an Xtreme CT-scanner (SCANCO Medical AG, Switzerland). Tal permitirá avaliar a DMO volumétrica para o osso cortical e trabecular, a estrutura óssea e a geometria (incluindo a espessura cortical e trabecular, separação trabecular, etc.).) e força óssea.

    as medições da pressão Arterial e tonometria:

    pressão Arterial e das medidas de rigidez arterial (tonometria) são realizadas duas vezes em cada participante em relação aos regimes de tratamento “C” e “D”.

    em ambas as ocasiões, as medições são realizadas de manhã com o participante no estado de jejum. Após a realização das medições, o participante receberá a intervenção juntamente com uma refeição de pequeno-almoço. Depois disso, o participante estará jejuando até que a próxima medição seja realizada quatro horas depois.

    a pressão arterial no escritório (BP) é medida na posição sentada após 5 minutos de repouso no braço direito utilizando um monitor BP automático digital. Três leituras BP serão realizadas com 2 minutos de descanso no meio. Regista-se a média das duas últimas medições.

    rigidez Arterial e velocidade de onda pulsada (PWV) serão avaliadas por tonometria usando o sistema Esfigmocor (Xcel; AtCor Medical, Sydney, NSW, Austrália). Para medições de PWV carótida-a-femoral, será utilizado um punho femoral inflado colocado na parte superior direita da coxa, combinado com a tonometria de applanação carótida. As medidas são realizadas em uma sala tranquila. O participante descansará 10 minutos em decúbito dorsal antes do início do ensaio. Mede-se a pressão arterial braquial no braço direito e realizam-se duas leituras consecutivas da pressão arterial. Se as leituras BP não diferirem por > 5 mmHg, o último é gravado. Se as leituras BP diferirem por > 5 mmHg, quatro leituras BP são obtidas. Regista-se a média das duas últimas medições. Aix é avaliada como a relação entre a amplitude da reflexão de onda e a pressão de pulso central. A média de duas medições é utilizada nas análises. A PWV carótida-femoral é avaliada como a distância percorrida dividida pelo tempo de trânsito utilizando a distância directa carótida-a-punho medida com uma fita não elástica (infantómetro). Realiza-se um mínimo de duas medições. Se as medições diferirem < 0,5 m / s, a média das duas medições é utilizada para análises. Se PWV diferir por > 0, 5 m / s, obtém-se uma terceira Medição e utiliza-se o valor mediano para as análises. De acordo com as recomendações gerais, a distância entre carótida e manguito média PWV é múltipla com 0, 8.