Um grande mamífero carnívoro do Final do Cretáceo e o Norte-Americano de origem de marsupiais
espécimes Fósseis e a sua idade geológica e o contexto
Os quatro espécimes de D. vorax neste estudo são curadoria em três repositórios: o estado de Dakota do Norte Geológico do Estado de conjunto de Fósseis no estado de Dakota do Norte Centro de Património Museu do Estado, em Bismarck, Dakota do Norte, EUA (NDGS); A Sierra College Museu de História Natural, Sacramento, Califórnia, EUA (SCNHM); and University of Washington Burke Museum of Natural History and Culture, Seattle, Washington, USA (UWBM). Os espécimes mais completos, NDGS 431 e UWBM 94084, formam a base primária para a descrição da morfologia do crânio (Nota complementar 1) e reconstrução (Fig. 2) of D. vorax with supplemental anatomical details incorporated from UWBM 94500 and SCNHM VMMa 20.
NDGS 431 (figos suplementares 1 e 2) é um crânio parcial com partes do zigomata, maxillae, palato e P3–M4 esquerdo. A braincase, basicranium e petrosals também são preservados, embora alguns aspectos sejam esmagados (figos suplementares 7-9). Os canais semicirculares do ouvido interno são completos apenas no lado direito, como revelado por tomografia computadorizada (CT) imaging (Supplementary Fig. 10). Encontrado em estreita associação com o crânio parcial, e aqui considerado parte do mesmo indivíduo, são fragmentárias premaxilas direita e esquerda (sem incisivos), ambos caninos, P1–P3 direita, P1 esquerda e P2, e o tímpano direito bulla e processo mastóide. O P3 e o M4 estão completamente em erupção, mas têm um desgaste dentário mínimo, levando à interpretação de que o NDGS 431 representa um jovem adulto (Nota complementar 1). Uma tripulação da NDGS escavou NDGS 431 em 2007 no terço superior da formação Hell Creek na localidade NDGS 27, 3,54 km a nordeste de Marmarth no Condado de Slope, sudoeste do Dakota do Norte. O espécime foi encontrado in situ dentro de uma unidade de arenito amarelo, estratificado, de grãos finos, com cerca de 75 cm de espessura e descontinuidade, prendendo lateralmente em uma unidade de arenito. Este depósito de canal-lag está a 2 m acima da base de uma exposição virada para o norte de uma pequena colina no meio de um pasto, e é coberto e coberto por lama cinzenta, com penas de pipoca. Um típico último Cretáceo (Lancian NA Land Mammal Age) Conjunto microfossil de vertebrados, incluindo dentes de dinossauro, foi encontrado como flutuante de superfície e fósseis de folhas foram encontrados no situ.
UWBM 94084 (figos suplementares 3 e 4) é um rostro incompleto com pré-Axilas emparelhadas e partes anteriores das maxilas e nasais. O I1 esquerdo e Direito e os caninos, o P1–P3 esquerdo e o P1–2 direito são preservados. O tamanho relativamente Grande do espécime e o desgaste plano nos pré-molares sugerem que o indivíduo era um adulto totalmente crescido. Uma Montanha Rochosa Dinossauro Centro de Recursos de tripulação encontrado UWBM 94084 em 2002, durante a escavação de um hadrosaurid esqueleto Wayne X Triceratops localidade (UWBM localidade C1526), 17.24 km a sudoeste de Rhame no Condado de Bowman, sudoeste do estado de Dakota do Norte. É da parte superior da formação de Hell Creek em uma unidade de arenito de grãos finos a médios com concreções hematíticas e limoníticas, e representa um depósito de lag do canal.
SCNHM VMMa 20 (figos suplementares 5a-d e 6a–d) é um fragmento de uma jugal anterior esquerda e maxila que inclui um P1, P2-M2 e alvéolos associados para M3 e M4. O desgaste dentário é menor, sugerindo que o espécime representa um jovem adulto. Uma equipe do Sierra College Natural History Museum recuperou a VMMa 20 da SCNHM em 2002 na área de Bug Creek, Condado de McCone, nordeste de Montana. O espécime foi encontrado como flutuante, mas a estratigrafia local sugere que foi da formação Hell Creek mais alta.
UWBM 94500 (figos suplementares 5e-h E 6e–h) é um fragmento de um jugal anterior esquerdo e maxila com parte do processo palatal, o P3–M2 e alvéolos para M3-M4. O desgaste dentário e o tamanho do espécime indicam que ele era de um adulto totalmente adulto, semelhante em tamanho ao indivíduo representado por UWBM 94084. A University of Washington crew excavated UWBM 94500 in 2012 in the uppermost Hell Creek Formation at the Second Level locality (UWBM local C1692 = University of California Museum of Paleontology locality V87101) in the McGuire Creek area, McCone County, northeastern Montana. O horizonte produtivo é de cinza escuro a marrom, arenito de grãos finos e estratificados, representando um depósito de lag do canal Paleoceno ∼19 m abaixo do carvão MCZ com os mais recentes fósseis cretáceos reformulados, incluindo dentes de dinossauro e provavelmente uwbm 94500 (ref. 45).
micro-CT scanning and processing
the main part of NDGS 431 was scanned at Pennsylvania State University. A resolução de cada fatia CT foi de 1.024 × 1.024 pixels, o espaçamento interpixel foi de 0.0672 mm, e o espaçamento interslice de 0.0673 mm. as partes associadas do NDGS 431 foram digitalizadas no laboratório Santana da Universidade de Washington (UW). A resolução de cada fatia CT era de 1,024 × 1,304 pixels, e o tamanho do pixel era de 0,0296, mm. UWBM 94084 foi digitalizado na instalação SANTA Da Escola de Medicina UW. A resolução de cada fatia CT era de 668 × 1,968 pixels, e o tamanho do pixel era de 0,0344 mm. UWBM 94500 e SCNHM VMMa 20 foram digitalizados na unidade de micro-CT da Universidade Duke em 0,0205, resolução mm. CT imagens de Didelphodon foi comparada com a existente didelphids D. virginiana e Chironectes minimus que foram analisadas na Universidade do Texas em Austin CT de ginástica (www.digimorph.org/specimens).
Um modelo composto de crânio foi montada no Geomagic Studio 2014.1.0 (3D Systems, Rock Hill, Carolina do Sul, EUA). Isolamento Digital dos petrosals, segmentação do labirinto ósseo e medições de endocastos digitais segmentados foram realizadas em Avizo 7.0 (Imagiologia VSG) seguindo os métodos anteriormente utilizados 46,47,48. Planos ortogonais através do crânio foram definidos seguindo métodos modificados a partir de Rodgers 49. Pontos ao longo das suturas mediais na metade posterior do crânio foram usados para definir o plano sagital vertical (XZ). Uma linha Ried modificada do centro da borda ventral do forame infraorbital ao centro da borda dorsal do meato auditivo externo foi usada para definir o plano horizontal (frontal) (XY). Normalmente, a borda inferior da órbita é usada, mas nenhuma órbita é preservada no espécime. A borda ventral do forame infraorbital é preservada apenas no lado esquerdo do crânio, mas as jantes dorsais de ambos os meati auditivos externos estão presentes. O plano axial (YZ) intersecta os centros das jantes dorsais do meato auditivo externo e é perpendicular aos planos sagital e horizontal.
análise filogenética
usámos uma matriz de dados de 164 caracteres (67 dentários, 86 cranianos e 11 mandibulares) que foram marcados para 48 taxa (13 taxa de grupo, 10 deltatheroidanos e 25 marsupialiformes). A matriz de dados foi derivada principalmente de Rougier et al.2,10,50 mas com modificações e adições de outros estudos anteriores 9, 11, 51, 52 e este estudo. Com base no novo material craniodental, atualizamos as pontuações de Didelphodon para 41 caracteres na matriz; 34 eram anteriormente desconhecidos (?) e sete eram conhecidos, mas revisados com novas informações. Didelphodon é hoje o marsupialiforme Cretáceo mais conhecido no conjunto de dados (88% dos caracteres marcados contra 72% em Bi et al.9). Para esta matriz de dados, nós também adicionamos duas NA Cenozóica marsupialiforms (Herpetotherium e Mimoperadectes informado pelo Peradectes), que havia sido incluído em outros dados matrices11,20, mas não nas matrizes de Rougier et al.2,10,50 ou seus derivados 9, 52. As pontuações para Herpetotherium e Mimoperadectes-Peradectes foram em grande parte baseadas em estudos anteriores 11,20 e nossas próprias observações. Algumas pontuações para Pucadelphys, Mayulestes, o ‘Gurlin Tsav crânio’ e Andinodelphys foram modificados a partir de Rougier et al.10 com base em Horovitz et al.11 e as nossas próprias observações. Nós usamos o Apêndice B de Horovitz e Sánchez-Villagra53 para correspondência de caráter em todos os estudos. A lista de caracteres e as pontuações do Didelphodon estão na Nota complementar 2. Submetemos nossa matriz de dados (dados suplementares 1)a uma pesquisa de nova tecnologia em TNT (versão 1.1) 54, usando as estratégias setorial, de roquete, de deriva e de fusão de árvores com 500 trees55,56 e designando 11 dos caracteres multi-estados como aditivo.
testando topologias de árvores alternativas
para testar se a topologia da nossa árvore de consenso estrita é robusta, nós a comparamos com duas topologias alternativas. Análises anteriores têm, em geral, colocadas NA Cretáceo-tronco marsupialiforms como um dos primeiros divergentes marsupialiform grupo ou como um grau distante da coroa do grupo, e SA-tronco marsupialiforms tem sido colocada como a irmã do táxon para Marsupialia2,9,10,50,52 ou Herpetotheriidae+Marsupialia11,20. Para comparar essas alternativas com nossa árvore de consenso estrito, realizamos testes Templeton em TNT (Nota complementar 4).Marsupialia é um clado Coroa formado pelo ancestral comum mais recente dos metaterianos existentes, mais todos os seus descendentes. De acordo com nossa análise filogenética, Mimoperadectes–Peradectes e Herpetotherium são incluídos juntamente com marsupiais existentes (Dromiciops, Didelphis e Marmosa) em Marsupialia. A origem dos marsupiais do grupo coroa é, portanto, limitada pela idade dos fósseis mais antigos atribuídos a Marsupialia: a mais antiga espécie conhecida de Peradectes (por exemplo, P. minor) são do Paleoceno inferior (médio Puercan, ca. 65.1 Myr ago) 32, whereas the oldest known species of Herpetotherium (for example, H. comstocki) are from the Eocene early (early Wasatchian, ca. 55 Myr ago). Porque Herpetotherium é um membro do monofilético Herpetotheriidae6,57, podemos ampliar ainda mais a sua linhagem de volta para, pelo menos, o membro mais antigo deste clado. Williamson and Lofgren58 placed Golerdelphys stocki, which is known by four isolated molars, in the Herpetotheriidae. Estes espécimes são da formação Goler da Idade Tiffanian média na Califórnia (Paleoceno médio, ca. 60 Myr ago). Além disso, Case et al.12 propôs o final do Maastrichtiano (Lanciano) Nortedelfis como um herpetoteriídeo, mas análises filogenéticas não apoiaram esta afirmação 6,57. O centrocrista em forma de V, partilhado por Nortedelphys e herpetoteriídeos, parece ter evoluído convergentemente nestes taxa 57. In recent phylogenetic analyses by Williamson et al.6.57, o falecido Campaniano (Juditiano, ca. 79-74 Myr ago) taxon Ectocentrocristus foxi falls among the herpetotheriids. No entanto, como este táxon é baseado em um único dente que alguns têm argumentado não é um molar, mas um Decíduo Quarto pré-molar de Turgidodon6, nós cuidadosamente interpretamos estes dados:os herpetoteriídeos mais antigos remontam ao Paleoceno médio (Fig. 3, estrela cinzenta), como representado por Golerdelphys, e possivelmente o falecido Campaniano (Fig. 3, grey star with query), como representado por Ectocentrocristus. Assim, de acordo com nossos resultados, a origem dos marsupiais da coroa estende-se pelo menos até o Paleoceno inicial (idade de Peradectes menor) e possivelmente o Campaniano tardio (idade de E. foxi).
Se o adicional de amostragem do Australidelphia leva a uma revisão filogenética colocação de Dromiciops tais que Mimoperadectes–Peradectes e Herpetotherium estão irmã táxons para, ao invés de incluir membros de Marsupialia, em seguida, a origem da coroa de marsupiais seria cedo Eoceno (54-52 Myr atrás)33 com base na mais antiga indiscutível coroa marsupial fósseis a partir de Itaboraí fauna local de Brazil59. Por sua vez, a origem dos marsupiais-tronco seria restringida pela idade da linhagem fantasma implícita pela Idade do membro mais velho do táxon-irmão, o Herpetotheriidae ou Peradectidae (Paleoceno inicial ou possivelmente Campaniano tardio).
Uma última alternativa a considerar é que alguns têm argumentado, com base dental semelhança, que Glasbius, a partir do final Maastrichtian (Lancian) de NA é irmã do táxon para o SA Polydolopimorphia60, que por sua vez tem sido aliado com o existente Caenolestidae ou existentes Microbiotheria53,p.61. Se correto, isso expandiria a adesão de Marsupialia e empurraria suas origens bem para o Cretáceo (100 milhões de anos atrás ou mais). No entanto, não estamos convencidos desta hipótese porque ela não foi rigorosamente testada em uma análise filogenética que utiliza uma ampla amostra de taxa e caracteres anatômicos. Em vez disso, nós seguimos Clemens16 em argumentar que as semelhanças dentárias destes taxa são provavelmente o resultado da evolução convergente para uma dieta frugívora/granívora, não compartilhada ancestralidade recente.
estimativas de massa corporal
numerosas equações de massa corporal preditiva foram desenvolvidas a partir de análises de regressão de medições craniodentais de mamaisexistentes 22,62. Para estimar a massa corporal em D. vorax, optámos por utilizar fórmulas desenvolvidas a partir de um conjunto de dados de dasiuromorfos22. Nós consideramos este conjunto de dados como o mais apropriado para a tarefa porque dasiuromorfos são um grupo taxonômico restrito de marsupiais e eles aproximam adequadamente a morfologia craniodental de Didelphodon. Esta equação também forneceu estimativas razoáveis de massa corporal para uma amostra de D. virginiana com dados de massa de tag (dados não apresentados aqui). Estimamos que o corpo massas de quatro espécimes de D. vorax: (1) relativamente completa do crânio de um adulto jovem (NDGS 431); o focinho de um indivíduo mais maduro (UWBM 94084); a quase completa dentary de jovens adultos (UWBM 102139); e a mais fragmentária dentary de um adulto jovem (UCMP 159909). Para NDGS 431, usamos as fórmulas que usam TSL e comprimento da linha superior-molar-oclusal (UMORL). Para UWBM 94084, nós estimamos TSL baseado na relação de escala entre o comprimento da ponta do focinho para P3–M1 embrasure e TSL em NDGS 431. Para os dentários, usamos as fórmulas para o comprimento da linha inferior-molar-e para o comprimento da linha inferior-molar-oclusal. Estas estimativas de massa corporal são apresentadas no quadro complementar 4. Nós usamos a estimativa de massa corporal para NDGS 431 do UMORL porque ele tem um erro de previsão mais baixo (14%) do que o da TSL (19%). As medições de UMORL não estão disponíveis para UWBM 94084, por isso usamos a estimativa da massa corporal a partir da TSL escalada.
estimativa do tamanho máximo da presa de D. vorax
o tamanho do corpo do predador restringe o tamanho máximo do corpo da presa que pode matar. Por razões energéticas e biomecânicas, predadores de pequeno a médio porte (<15-20 kg) mais comumente se alimentam de pequenos vertebrados e invertebrados que são apenas uma pequena fração de sua própria massa corporal 36,63,64. Meers23 desenvolveu uma fórmula de regressão para prever o tamanho máximo da presa a partir da massa corporal de um predador, usando um grande conjunto de dados de predadores existentes e seus maiores itens de presas conhecidos. Para corrigir para a transformação logarítmica bias65, Meers23 calculou um estimador de Razão (RE) fator de correção de acordo com o método de Snowdon66. Como esse fator de correção RE não foi relatado, reconstruímo-lo a partir da fórmula de regressão e do apêndice de dados comparativos em Meers23. Aplicámos a fórmula de Meers e o factor de correcção RE reconstruído a quatro estimativas de massa corporal diferentes de D. vorax (tabela suplementar 4). As estimativas e os intervalos de confiança de 95% são apresentados no quadro complementar 5.
Bite force analysis
To estimate bite force in D. vorax and other taxa, we replicated Thomason’s method using two-dimensional images of digital surface models instead of photographs of dry skulls67,68. Nesta análise, usamos o modelo compósito da tomografia computadorizada D. Material craniano vorax. Arquivos de estereolitografia de crânios de L. canadensis (UCLA 15275), S. harrisii (USNM 307639), T. taxus (LACM 45012) e D. virginiana (TMM M-2517) foram baixados da base de dados DigiMorph. O lado esquerdo do modelo do crânio composto de D. vorax NDGS 431 é o mais completo, então para todos os taxa nós fizemos medições do lado esquerdo do crânio e dobrou a força de mordida estimada para explicar as forças de mordedura bilaterais.
As variáveis necessárias para o cálculo de mordida vigor a partir de medidas lineares do crânio incluem o seguinte: estima-se fisiológicas área da seção transversal (PCSA) dos grupos musculares envolvidos na mandíbula adução; o comprimento dos braços de alavanca de cada músculo vetor de força sobre o temporal–mandibular articulação (ATM), e o comprimento da outlever; ou a distância a partir da articulação TEMPOROMANDIBULAR eixo da mordida ponto. Os nossos cálculos da força de mordida baseiam-se nas contribuições do músculo temporalis e dos músculos combinados masséteres e pterigóides. A estimativa temporal PCSA, os crânios foram digitalmente posicionado no Geomagic Studio usando quatro pontos sobre o crânio para definir o plano de posterodorsal de vista: o mais posterior pontos de esquerda e direita arcos zigomático, e o mais lateral pontos de esquerda e direita postorbital processes68. A área combinada de masséter e pterigóide foi estimada posicionando os crânios na visão ventral. A área temporal foi delineada como a fossa infraatemporal esquerda delimitada pelo arco zigomático e caso cerebral em vista posterodoral (Figo suplementar. 11a), e a área masseter e ptergyoid foi delineada como a fossa infraatemporal delimitada pelo arco zigomático e caso cerebral na visão ventral (Figo suplementar. 11b) 67. A área das seções musculares estimadas e os centroids da área foram calculados em ImageJ v1. 49 (U. S. National Institutes of Health, Bethesda, Maryland, EUA).embora muitos valores de estresse muscular tenham sido usados na literatura, nós usamos um valor constante de estresse muscular de 300 kPa (ref. 24) multiplicado pelo PCSA estimado para calcular a força da temporalis, T, e do masseter e pterigóide, M. A força muscular foi então aplicada ao crânio como um único vetor de força atuando perpendicular ao plano da área transversal do músculo, através da área centroide (figura suplementar. 11c). O braço da alavanca do masseter, m, foi medido como a distância perpendicular da área centroide ao TMJ na visão ventral (Figo suplementar. 11b) in ImageJ. O temporal centróide e o plano da estimativa de PCSA foram transferidos para o crânio, em vista lateral, e temporal do braço de alavanca, t, foi medido como a distância perpendicular do centróide para a articulação TEMPOROMANDIBULAR (Complementar Fig. 12c). O comprimento da alavanca exterior o foi medido como a distância lateral do TMJ para dois pontos de mordida, um na ponta do canino e um no centro do primeiro molar. Mordida vigor, em seguida, foi calculado a partir da soma dos momentos gerados pelo temporal e masseter forças sobre a articulação TEMPOROMANDIBULAR dividido pela distância da mordida ponto, que foi, em seguida, dobrou a conta de acordos bilaterais de biting67:
as Nossas medições e mordida força de estimativas, são apresentados no Quadro Suplementar 6. Só podemos estimar forças de mordida para D. vorax usando o crânio mais pequeno e completo (NDGS 431); no entanto, nós iríamos prever maiores estimativas da força de mordida para o maior UWBM 94084. À luz das quase idênticas estimativas da força de mordida canina para S. harrisii por nós e por Wrie et al.24, utilizando espécimes diferentes, temos confiança de que os nossos resultados para os outros taxa são consistentes com os apresentados na Tabela 1 de Wroe et al.24 escalas de força de mordida com massa corporal 23,24, tal que a comparação de estimativas de força de mordida em uma ampla gama de tamanhos do corpo é problemática. Para ajustar para esta alometria de tamanho do corpo e para permitir comparações de forças mordidas relativas, Wrie et al.24 BFQ estimado, que utiliza os resíduos da regressão da massa corporal logarítmica e da força de mordida logarítmica estimada. O quadro complementar 7 contém os dados relativos à massa corporal e à força de mordida canina do Quadro 1 de Wrie et al.24 e este estudo. A partir desse conjunto de dados, realizamos uma regressão de massa corporal log versus CBs Log. A fórmula de regressão foi então utilizada para calcular novos valores de BFQ para todos os taxa. Algumas QB diferem ligeiramente das Do Quadro 1 de Wroe et al.24 devido às fórmulas de regressão específicas do conjunto de dados. Para D. vorax, nós usamos a estimativa da massa corporal máxima para NDGS 431 (tabela suplementar 4) como uma estimativa conservadora de BFQ (estimativas da massa corporal mais baixa produzem BFQ mais elevadas).
tamanho pré-molar relativo
Van Valkenburgh25 e Hartstone-Rose26 discriminados entre as Categorias dietéticas em carnívoros e marsupiais usando uma série de índices cranianos e odontológicos. Em especial, constataram que o RPS era maior entre os taxa durofágicos em comparação com todas as outras categorias dietéticas. RPS foi calculado para D. vorax como descrito no Apêndice 2 de Van Valkenburgh25: a largura máxima do pré-molar final (em mm) foi dividida pela raiz cúbica da massa corporal (em kg).Van Valkenburgh e Ruff28 investigaram a ligação biomecânica entre a forma dentária canina e o comportamento de alimentação em grandes carnívoros, modelando o dente canino como um feixe sólido e, por sua vez, estimando a sua resistência a forças de flexão nas direções anteroposterior e mediolateral. Aplicámos esses métodos a espécimes de D. vorax, D. virginiana, S. harrisii e T. taxus (quadro complementar 9). Todas as medições foram feitas com calipers digitais em espécimes reais, como mostrado na Fig. 1 de Van Valkenburgh e Ruff28 e de acordo com os métodos em seu texto. Em seguida, adicionamos nossos dados ao seu conjunto de dados e fizemos gráficos bivariados para examinar a forma canina de D. vorax no contexto mais amplo de predadores de mamíferos existentes (Figo suplementar. 12 e quadro complementar 10).
Mandibular, força de dobra da análise
Therrien29 investigou a biomecânica ligação entre mandibular forma e o comportamento de alimentação existentes no carnivorans por modelar o corpo mandibular como um sólido feixe, e, por sua vez, a estimativa de sua resistência às forças de flexão no médio-lateral e o dorsoventral aviões. Dadas as mesmas propriedades materiais do osso, um corpo mandibular dorso-ventral profundo é mais capaz de suportar forças no plano dorsoventral, enquanto um corpo mandibular mediolateralmente largo é mais capaz de suportar forças no plano mediolateral. Aplicámos estes métodos a espécimes de D. vorax, D. virginiana e S. harrisii (tabela complementar 11). Todas as medições foram feitas com calipers digitais em espécimes reais, como mostrado na Fig. 2 de Therrien29 e de acordo com os métodos desse texto. Como os metaterianos diferem dos carnívoros existentes na fórmula dentária, fizemos medições em diferentes intervalos interdentais: canino; p2-p3; p3–m1; m1–m2; m2–3; e pós m4. As dimensões transversais e, por sua vez, as forças de flexão podem variar ao longo do corpo mandibular de uma forma que se correlaciona com os comportamentos alimentares dos carnívoros existentes 29. Para comparação com taxa em Figs 3-7 de Therrien29, nós plotamos nossos dados como perfis de força mandibular em Figo suplementar. 13.
análise de microwear dentário de baixa ampliação
microwear dentário é usado como um proxy para inferir o comportamento alimentar de cada animal. É quantificado pela contagem de buracos e arranhões no esmalte da superfície oclusal dos dentes e tem sido amplamente utilizado para estudar a dieta de uma variedade de mamais69,70. Estas características refletem as propriedades materiais dos alimentos e itens exógenos eaten71. Especificamente, uma alta densidade de arranhões sugere a ingestão de alimentos abrasivos (incluindo material vegetal e grãos), enquanto que poços abundantes indicam uma dieta composta de alimentos duros de ambas as plantas (por exemplo, sementes e frutos secos) e fontes animais (por exemplo, ossos e conchas)72,73. Ao quantificar o microwear de espécies com dietas conhecidas, Um conjunto de dados comparativos pode ser construído e, em seguida, usado para estimar a dieta de taxa para a qual a ingestão de alimentos é desconhecida, incluindo espécies extintas. Embora vários estudos tenham quantificado o microwear de numerosos mamíferos existentes cuja dieta é conhecida, análises de erro entre observadores demonstram que cada investigação da dieta de taxa Fóssil deve desenvolver o seu próprio conjunto de dados comparativos 74.portanto, quantificamos microwear em 16 mamíferos modernos. Focamos nossa amostra em pequenos mamíferos com massas corporais comparáveis às dos táxons Mesozoicos em geral, e Didelphodon em particular, incluindo numerosos marsupiais. As suas dietas vão do carnívoro ao herbívoro, incluindo omnívoros, insectívoros e animais capazes de durofagia (quadro complementar 12). Dietas de mamíferos existentes foram retiradas da literatura. Com base nos itens alimentares dominantes consumidos pelo animal, categorizamos cada táxon em uma de cinco categorias dietéticas: carnivoria; omnivoria dominada por animais; omnivory; omnivory dominada por plantas; e herbivory.todos os espécimes amostrados foram indivíduos adultos de colecções de museus recolhidas em meio selvagem (a dieta de um animal em cativeiro não é representativa do comportamento selvagem desse animal). Como as características do microwear contadas por diferentes observadores não podem ser comparadas, apenas um pesquisador (J. J. C.) contou buracos e arranhões na superfície dentária dos espécimes amostrados. Usamos baixa ampliação estereomicroscopia para quantificar microwear em nossa amostra. As amostras foram observadas sob um microscópio Leica MZ 9.5 com um objetivo × 2.0. Características de Microwear foram contadas usando um retículo para contar uma área consistente do dente através de amostras (0,3 mm2) a × 70 ampliação. Devido às suas propriedades de esmalte, o esmalte dentário não pode ser observado diretamente sob o estereomicroscope69. Portanto, moldamos espécimes e deixamos claras, de alta definição, moldes epóxi do dente de interesse, seguindo o método de Solunias e Semprebon69. Na sequência de estudos anteriores, contámos microwear nos segundos molares superiores e inferiores dos mamíferos euterianos 75, excepto carnívoros para os quais contámos o primeiro molar76 superior ou inferior. Contámos os dentes análogos, o terceiro molar superior e inferior, dos metaterianos. Microwear foi contado na superfície de esmagamento do dente: a protocona dos molares superiores, ou a bacia talonida dos molares inferiores. Em cada dente, foram quantificadas nove características diferentes (tabelas suplementares 14 e 15): quatro tipos diferentes de poços (pequenos poços, grandes poços, pequenos poços de punção e grandes poços de punção) e cinco tipos diferentes de arranhões (arranhões cruzados, arranhões finos, arranhões grosseiros, arranhões e arranhões). Excluímos do nosso conjunto de dados espécimes fósseis com damage77 tafonómico.avaliámos o erro intra-observador contando um subconjunto de 20 espécimes, incluindo um carnívoro (l. canadensis), dois omnívoros dominados por animais (Nasua narica e T. glis) e um omnívoro dominado por plantas (Trydactylus Potoroso), duas vezes e comparando as duas contagens independentes (tabela complementar 13). A consistência intra-observador nas contagens de microwear foi calculada utilizando o coeficiente de correlação de ordem de rank de Spearman, que não é tão sensível a valores anómalos e distribuições não-normais como outros coeficientes. Como a maioria das fossas são pequenas fossas e a maioria dos arranhões são arranhões cruzados, também fizemos análises de correlação para estas duas categorias de características de microwear. O número de características de microwear contabilizadas para cada espécime foi normalizado pelo número total de características de microwear contabilizadas para o espécime para ter em conta as diferenças no número de características de microwear entre os espécimes. A percentagem de cada categoria de características de microwear para cada espécime foi utilizada numa análise multivariada da assinatura de microwear (ou seja, percentagens combinadas das diferentes categorias de características de microwear). Devido à natureza não-normal e não-linear dos nossos dados, que incluem muitos zeros, nós usamos o PCoA para construir um espaço multivariado de microwear para visualizar semelhanças entre a assinatura de microwear de D. vorax e a dos mamíferos existentes (Figo suplementar. 14). A análise das características do microwear foi feita em R 3.1.3 (ref. 78) usando RStudio 0, 98, 1103 (ref. 79) e a embalagem vegan 2.3–4 (ref. 80).