RNA-sekvensointi Vs. Mikroarrayt
tämä teknologinen muutos geeniekspressioprofiloinnissa ei ole yllätys, kun otetaan huomioon, mitä RNA-seq mahdollistaa:
- uusien, annotoimattomien geenien havaitseminen
- sekvenssitason muutosten havaitseminen (koodausalueen mutaatiot, geenien fuusiot, A-to-I-muokkaustapahtumat)
- vaihtoehtoisten, jopa uusien tapahtumien havaitseminen, toisin kuin vakiomikrorauskuilla
- laajempi dynaaminen alue, jota voidaan säätää ohjaamalla sekvenssisyvyyttä
- ei-referenssieliöiden ekspressioprofilointi (vähemmän suoraviivaista mutta do-able!) ja niin edelleen.
useimmissa tapauksissa näytteesi lausekeprofiilin saaminen olisi silti hieman halvempaa käyttämällä mikrorakeita RNA-sekvensoinnin sijaan, ero on välillä 50-100 EUR / USD näytettä kohti. RNA-seq: n hyödyt voivat kuitenkin helposti ylittää lisäkustannukset.
tästä huolimatta mikrorauskut eivät ole kokonaan kadonneet. Analysoimme säännöllisesti microarray expression-tietoja asiakkaillemme (joskaan ei yhtä paljon kuin RNA-seq). Ilmaisumittauksia suunnittelevat tutkijat kysyvät yhä usein mielipidettämme siitä, mitä teknologiaa kannattaa käyttää.
todellinen kysymys tässä on: milloin, jos koskaan, on järkevää käyttää mikroraketteja RNA-sekvensoinnin sijaan?
joskus siinä on järkeä. Sinulla voi olla hyvä syy pitää kiinni mikrorakenteista, jos 1) mikään yllä luetelluista parametreista ei ole kriittinen, ja / tai 2) jokin seuraavista pätee:
- käytät mikroarray-pohjaista diagnostista testiä, jolla on todistettu kliininen hyödyllisyys,
- sinulla on suuri määrä näytteitä ja kustannukset ovat kriittiset,
- haluat pystyä vertaamaan lausekeprofiileja suoraan saman matriisialustan toiseen microarray-datajoukkoon, tai
- sinulla on käynnissä microarray-työnkulku talon sisällä (tai luotettavien kumppaneiden kanssa) näytteiden keruusta data-analyysiin, johon olet tyytyväinen
lopuksi yksi piste bioinformatikon näkökulmasta, jota kannattaa harkita: jos tiimissäsi on tutkija, joka käyttää dataa bioinformatiikan oppimiseen, muista, että RNA-seq-data-analyysi on ehdottomasti hyödyllisempi taito nykyaikana (ja tulevaisuudessa!) labs kuin mikroarray analyysi.
yllä olevien luetteloiden pitäisi auttaa sinua tekemään RNA-seq vs. microarray-päätös. Keskustelu bioinformaatikon tai mittaustoimittajan kanssa kannattaa kuitenkin aina käydä, jotta voi valita alustan, joka parhaiten vastaa biologista aineistoa, tutkimuskysymyksiä ja budjettia.
Lue lisää out-palvelumallista tai ota meihin yhteyttä ja kysy, miten voimme auttaa sinua!