Kontroll över dina Cre rekombinasexperiment
Cre Rekombinase Gesicles
- Flox dina celler på begäran
- se snabbare, effektivare rekombination
- förenkla experiment med ett snabbt, enkelt protokoll
- minimera oavsiktliga rekombinationshändelser
vad händer om du hade full kontroll över dina rekombinasexperiment? Cre Rekombinase Gesicles ger dig denna kontroll och mycket mer. Som ett kraftfullt verktyg för genomisk modifiering utan användning av nukleinsyror förbättrar gesikeltekniken rekombinasleverans till målceller med uppgraderingar i både användarvänlighet och experimentell flexibilitet. Besök vår tekniska anteckning för mer data.
Vad är Cre Rekombinase Gesicles?
Cre-rekombinas är ett platsspecifikt rekombinas isolerat från P1-bakteriofagen som katalyserar rekombination mellan två 34-bp loxP-platser. Det används ofta för knockout och knockin studier: DNA-sekvensen som ligger mellan två tandemupprepningar av loxP-platser kan skäras ut för att skapa en deletionsmutant, eller en plasmid som innehåller en enda loxP-plats kan genomgå platsspecifik integration i ett genom som innehåller loxP för att skapa en insättningsmutant.
Cre-Rekombinasgesiklar är cell-härledda nanovesiklar som innehåller koncentrerat Cre-rekombinasprotein. När de appliceras på dina målceller smälter de samman med plasmamembranet och släpper ut aktivt Cre-rekombinas i cellen, där det utför Cre-medierad rekombination mellan loxP-platser. Ingen Cre – rekombinas-kodande gen är närvarande. Således finns det ingen risk för ihållande rekombinasuttryck i dina celler, och risken för oavsiktliga rekombinationshändelser minimeras.
applikationer för Cre-Rekombinasgesiklar inkluderar:
- leverans av Cre-rekombinas för knockout-och knockinstudier
- begränsning och kontroll av platsspecifika rekombinationshändelser, inklusive raderingar, Infogningar, translokationer och inversioner
Cre-Rekombinasgesiklar levererar Cre-rekombinasprotein till alla däggdjursceller snabbt, effektivt och utan nukleinsyror.
hur förbättrar gesiklar Cre-rekombinasexperiment?
Gesicle-tekniken banar väg för ett brett spektrum av experimentella möjligheter, med viktiga funktioner som sparar tid och erbjuder oöverträffad prestanda.
| Benefits of Cre Recombinase Gesicles | |
| Feature | Advantage |
| Simple protocol: just apply 10–20 µl of the gesicles to target cells. | Easier to use than plasmid or viral gene delivery. No preparation or pretreatment required. |
| Compatible with most cell types. | fungerar bra med delande och icke-delande celler, primära celler och cellinjer. Låg toxicitet upprätthåller cellens livskraft bättre än andra transfektionsmetoder. |
| Protein är närvarande och aktivt så snart gesiklar appliceras på celler. | effektiv leverans och hög aktivitet av Cre-rekombinas. Ingen fördröjning för transkription och översättning. |
| ingen Cre – rekombinas-kodande gen närvarande. | ingen risk för ihållande Cre-rekombinasuttryck i celler. Begränsade oavsiktliga rekombinationshändelser. |
| Gesiklar är märkta med CherryPicker rött fluorescerande protein. | enkel visualisering av leverans till celler. |
LacZ reporter-analysen nedan jämför direkt två Cre-rekombinasleveransmetoder: plasmidtransfektion och gesiklar. I detta exempel är uttryck av lacZ endast möjligt när uppströms loxP-flankerad stoppkodon skars ut genom rekombinasaktivitet. Användning av gesiklar resulterade i snabbare och effektivare excision än plasmid transfektion leverans av Cre rekombinas.
snabb och effektiv genommodifiering med Cre-Rekombinasgesiklar. En cellinje som hyser en integrerad, loxP-villkorlig lacZ-expressionskassett (toppanel) transfekterades antingen med en plasmid som uttrycker Cre-rekombinas (Bottenpanel, mittbild) eller behandlades med Cre-Rekombinasgesiklar (Bottenpanel, höger bild). 24 timmar efter behandling färgades celler för LacZ-uttryck med användning av Beta-Galaktosidasfärgningssatsen.