Ellenőrzése alatt a CRE rekombináz kísérletek
Cre Rekombináz Gesicles
- Flox a sejtek igény
- lásd gyorsabb, hatékonyabb rekombináció
- egyszerűsítse kísérletek egy gyors, egyszerű protokoll
- minimalizálása nem kívánt rekombinációs események
mi lenne, ha már teljes ellenőrzése alatt a rekombináz kísérletek? A CRE Recombinase Gesicles megadja ezt az irányítást és még sok mást. A nukleinsavak használata nélküli genomiális módosítás hatékony eszközeként a gesicle technológia javítja a rekombináz szállítását a célsejtekbe, mind a könnyű használat, mind a kísérleti rugalmasság terén. Kérjük, látogasson el a tech megjegyzés további adatokat.
mik azok a CRE Rekombináz Gesicles?
a Cre rekombináz a P1 bakteriofágból izolált helyspecifikus rekombináz, amely katalizálja a rekombinációt két 34 bp loxP hely között. Széles körben használják knockout és knockin tanulmányokhoz: a LOXP helyek két tandem ismétlése között elhelyezkedő DNS-szekvencia kivágható deléciós mutáns létrehozása céljából, vagy egy egyetlen loxP helyet tartalmazó plazmid helyspecifikus integráción mehet keresztül egy loxp-t tartalmazó genomba, hogy beillesztési mutánst hozzon létre.
a Cre Rekombináz Gesicles sejt eredetű nanovesicles, amely koncentrált Cre rekombináz fehérjét tartalmaz. Amikor a célsejtekre alkalmazzák, összeolvadnak a plazmamembránnal, és aktív Cre rekombinázt ürítenek a sejtbe, ahol Cre által közvetített rekombinációt hajt végre a loxP helyek között. Nincs CRE rekombináz kódoló gén. Így a sejtekben nem áll fenn a tartós rekombináz expresszió kockázata, és a nem szándékos rekombinációs események esélye minimálisra csökken.
A Cre Rekombináz Gesicles alkalmazásai a következők:
- Cre rekombináz szállítása knockout és knockin vizsgálatokhoz
- a helyspecifikus rekombinációs események korlátozása és ellenőrzése, beleértve a törléseket, beillesztéseket, transzlokációkat és inverziókat
a Cre Rekombináz Gesicles gyorsan szállítja a Cre rekombináz fehérjét bármely emlőssejtbe, hatékonyan, nukleinsavak nélkül.
hogyan javítják a gesicles a Cre rekombináz kísérleteket?
a Gesicle technológia megnyitja az utat a kísérleti lehetőségek széles skálájához, olyan kulcsfontosságú funkciókkal, amelyek időt takarítanak meg és páratlan teljesítményt nyújtanak.
| Benefits of Cre Recombinase Gesicles | |
| Feature | Advantage |
| Simple protocol: just apply 10–20 µl of the gesicles to target cells. | Easier to use than plasmid or viral gene delivery. No preparation or pretreatment required. |
| Compatible with most cell types. | jól teljesít osztódó és nem osztó sejtekkel, primer sejtekkel és sejtvonalakkal. Az alacsony toxicitás jobban fenntartja a sejtek életképességét, mint más transzfekciós módszerek. |
| a fehérje jelen van és aktív, amint a gesztikulákat a sejtekre alkalmazzák. | a CRE rekombináz hatékony szállítása és nagy aktivitása. Nincs késés a transzkripcióra és a fordításra. |
| nincs jelen CRE rekombináz kódoló gén. | nincs kockázata a CRE rekombináz expressziójának a sejtekben. Korlátozott nem szándékos rekombinációs események. |
| a Gesztikulákat CherryPicker vörös fluoreszcens fehérjével jelölik. | a cellákba történő szállítás Egyszerű megjelenítése. |
az alábbi LacZ reporter vizsgálat közvetlenül összehasonlítja a két CRE rekombináz szállítási módszert: a plazmid transzfekciót és a gesicles-t. Ebben a példában a lacZ expressziója csak akkor lehetséges, ha az upstream loxP-oldalú stop kodont rekombináz aktivitással kivágtuk. A gesicles alkalmazása gyorsabb és hatékonyabb kivágást eredményezett, mint a CRE rekombináz plazmid transzfekciós szállítása.
gyors és hatékony genommódosítás Cre Rekombináz Gesicles alkalmazásával. Egy integrált, loxp-feltételes lacZ expressziós kazettát (felső panelt) tartalmazó sejtvonalat vagy transzfektáltunk a plazmid expresszáló Cre rekombináz (Alsó panel, középső kép), vagy kezeltük Cre Rekombináz Gesicles (Alsó panel, jobb kép). 24 órával a kezelés után a sejteket Lacz expresszióra festettük a béta-galaktozidáz Festőkészlet segítségével.