Controlul asupra experimentelor de recombinază Cre
Gesicles de Recombinază Cre
- Flox celulele la cerere
- vedeți recombinarea mai rapidă și mai eficientă
- Simplificați experimentele cu un protocol rapid și ușor
- minimizați evenimentele de recombinare neintenționate
Ce se întâmplă dacă ați avea control deplin asupra experimentelor de recombinază? Cre Recombinase Gesicles vă oferă acest control și multe altele. Ca un instrument puternic pentru modificarea genomică fără utilizarea acizilor nucleici, tehnologia gesicle îmbunătățește livrarea recombinazei către celulele țintă, cu îmbunătățiri atât în ușurința utilizării, cât și în flexibilitatea experimentală. Vă rugăm să vizitați nota noastră tech pentru mai multe date.
ce sunt Gesiculele de Recombinază Cre?
recombinaza Cre este o recombinază specifică sitului izolată din bacteriofagul P1 care catalizează recombinarea între două situsuri loxP de 34 bp. Este utilizat pe scară largă pentru studiile knockout și knockin: secvența ADN situată între două repetări tandem de site-uri loxP poate fi excizată pentru a crea un mutant de ștergere sau o plasmidă care conține un singur site loxp poate suferi integrare specifică site-ului într-un genom care conține loxP pentru a crea un mutant de inserție.
Gesiculele de Recombinază Cre sunt nanovezicule derivate din celule care conțin proteine concentrate de recombinază Cre. Atunci când sunt aplicate pe celulele țintă, acestea fuzionează cu membrana plasmatică și descarcă recombinaza Cre activă în celulă, unde efectuează recombinarea mediată de Cre între locurile loxP. Nu este prezentă nicio genă codificatoare de recombinază Cre. Astfel, nu există niciun risc de exprimare susținută a recombinazei în celulele dvs., iar șansa evenimentelor de recombinare neintenționate este redusă la minimum.
aplicațiile pentru Gesiculele de Recombinază Cre includ:
- livrarea de recombinază Cre pentru studiile knockout și knockin
- limitarea și controlul evenimentelor de recombinare specifice site-ului, inclusiv ștergeri, inserții, translocații și inversiuni
Gesiculele de Recombinază Cre livrează proteina de recombinază Cre la orice celulă mamifer rapid, eficient, și fără acizi nucleici.
cum îmbunătățesc gesiculele experimentele cu cre recombinază?
Tehnologia Gesicle deschide calea pentru o gamă largă de posibilități experimentale, cu caracteristici cheie care economisesc timp și oferă performanțe de neegalat.
| Benefits of Cre Recombinase Gesicles | |
| Feature | Advantage |
| Simple protocol: just apply 10–20 µl of the gesicles to target cells. | Easier to use than plasmid or viral gene delivery. No preparation or pretreatment required. |
| Compatible with most cell types. | funcționează bine cu celulele care se divid și nu se divid, celulele primare și liniile celulare. Toxicitatea scăzută menține viabilitatea celulară mai bine decât alte metode de transfecție. |
| proteina este prezentă și activă imediat ce gesiculele sunt aplicate celulelor. | livrare eficientă și activitate ridicată a recombinazei Cre. Nici o întârziere pentru transcriere și traducere. |
| nu este prezentă gena de codificare a recombinazei Cre. | nici un risc de Expresie susținută a recombinazei Cre în celule. Evenimente limitate de recombinare neintenționate. |
| Gesicles sunt etichetate cu proteină fluorescentă roșie CherryPicker. | vizualizare ușoară a livrării către celule. |
testul Reporter LacZ de mai jos compară direct două metode de livrare a recombinazei Cre: transfecția plasmidelor și gesicles. În acest exemplu, expresia lacZ este posibilă numai atunci când codonul stop loxp flancat în amonte a fost excizat prin activitatea recombinazei. Utilizarea gesicles a dus la o excizie mai rapidă și mai eficientă decât livrarea de transfecție plasmidă a recombinazei Cre.
modificare rapidă și eficientă a genomului folosind Gesicule de Recombinază Cre. O linie celulară care adăpostește o casetă de Expresie lacZ integrată, loxp-condiționată (panoul superior) a fost fie transfectată cu o plasmidă care exprimă cre recombinază (panoul de jos, imaginea de mijloc), fie tratată cu Cre Recombinază Gesicles (panoul de jos, imaginea din dreapta). 24 ore după tratament, celulele au fost colorate pentru expresia LacZ folosind kitul de colorare Beta-galactozidază.