O controle sobre sua Cre recombinase experimentos
a Cre Recombinase Gesicles
- Flox suas células na demanda
- Veja mais rápido, mais eficiente a recombinação
- Simplificar experimentos com uma rápida, fácil protocolo
- não intencionais Minimizar fenómenos de recombinação
e se você tivesse total controle sobre sua recombinase experiências? Cre Recombinase Gesicles lhe dá este controle e muito mais. Como uma ferramenta poderosa para a modificação genômica sem o uso de ácidos nucleicos, a tecnologia gesicle melhora a entrega recombinase para as células alvo com atualizações tanto na facilidade de uso quanto na flexibilidade experimental. Por favor, visite a nossa nota técnica para mais dados.o que são “Cre Recombinase Gesicles”?
a CRE recombinase é uma recombinase específica do local isolada a partir da bacteriofagem P1 Que cataliza a recombinação entre duas zonas de loxP 34. É amplamente usado para estudos knockout e knockin: a sequência de DNA localizada entre duas repetições em tandem de sites de loxP pode ser excisada para criar um mutante deletado, ou um plasmídeo contendo um único site de loxP pode sofrer integração específica de um site em um genoma contendo loxP para criar um mutante de inserção.os Gesículos de Cre Recombinase são nanovesículos derivados de células que contêm proteína concentrada de CRE recombinase. Quando aplicados às células-alvo, fundem-se com a membrana plasmática e descarregam a CRE recombinase activa na célula, onde realiza recombinação Cre-mediada entre locais de loxP. Não está presente nenhum gene de codificação de CRE recombinase. Assim, não há risco de expressão de recombinase sustentada em suas células, e a chance de eventos de recombinação não intencional é minimizada.as aplicações da Cre Recombinase Gesicles incluem: distribuição de CRE recombinase para os estudos ko e knockin, limitação e controlo de eventos de recombinação específicos do local, incluindo supressões, inserções, translocações e inversões rápida, eficiente e sem ácidos nucleicos.
como é que os gesicles melhoram as experiências de recombinase Cre?
a tecnologia gesticular abre caminho para uma ampla gama de possibilidades experimentais, com características-chave que economizam tempo e oferecem desempenho incomparável.
| Benefits of Cre Recombinase Gesicles | |
| Feature | Advantage |
| Simple protocol: just apply 10–20 µl of the gesicles to target cells. | Easier to use than plasmid or viral gene delivery. No preparation or pretreatment required. |
| Compatible with most cell types. | tem um bom desempenho com células divisoras e não dividoras, células primárias e linhas celulares. A baixa toxicidade mantém a viabilidade celular melhor do que outros métodos de transfecção.a proteína está presente e activa assim que os gesicles são aplicados às células.distribuição eficiente e elevada actividade da Cre recombinase. Não há atraso na transcrição e tradução. |
| nenhum gene de codificação da Cre recombinase presente. | não há risco de uma expressão contínua de recombinase Cre nas células. Eventos limitados de recombinação não intencional. |
| Gesicles are labeled with CherryPicker red fluorescent protein.visualização fácil da entrega às células. | |
O repórter LacZ ensaio abaixo directamente compara dois Cre recombinase métodos de entrega: plasmídeo transfection e gesicles. Neste exemplo, a expressão do lacZ só é possível quando o codão de paragem flanqueado a montante do loxP foi excisado pela actividade de recombinase. A utilização de gesicles resultou numa excisão mais rápida e mais eficiente do que a transferência de plasmídeos de CRE recombinase.
modificação rápida e eficiente do genoma usando Cre Recombinase Gesicles. Uma linha celular que albergava uma cassete de expressão lacZ (Painel superior) integrada e condicional foi transfectada com um plasmídeo que expressava CRE recombinase (Painel inferior, imagem do meio) ou tratada com Cre Recombinase Gesicles (Painel inferior, imagem direita). Após o tratamento, as células foram manchadas para a expressão da LacZ utilizando o Kit de coloração da Beta-Galactosidase.