Contrôle de vos expériences de recombinase Cre
Gesicles de recombinase Cre
- Floxez vos cellules à la demande
- Voyez une recombinaison plus rapide et plus efficace
- Simplifiez les expériences avec un protocole rapide et facile
- Minimisez les événements de recombinaison involontaires
Et si vous aviez un contrôle total sur vos expériences de recombinase? Cre Recombinase Gesicles vous donne ce contrôle et bien plus encore. En tant qu’outil puissant pour la modification génomique sans l’utilisation d’acides nucléiques, la technologie gesicle améliore l’administration de la recombinase aux cellules cibles avec des améliorations en termes de facilité d’utilisation et de flexibilité expérimentale. Veuillez consulter notre note technique pour plus de données.
Que sont les gésicules de Cre Recombinase?
La recombinase Cre est une recombinase spécifique au site isolée du bactériophage P1 qui catalyse la recombinaison entre deux sites loxP de 34 pb. Il est largement utilisé pour les études de knock-out et de knockin: la séquence d’ADN située entre deux répétitions en tandem de sites loxP peut être excisée pour créer un mutant de délétion, ou un plasmide contenant un seul site loxP peut subir une intégration spécifique au site dans un génome contenant loxP pour créer un mutant d’insertion.
Les gésicules de Cre Recombinase sont des nanovésicules dérivées de cellules contenant une protéine concentrée de Cre recombinase. Lorsqu’ils sont appliqués à vos cellules cibles, ils fusionnent avec la membrane plasmique et déchargent la recombinase Cre active dans la cellule, où elle effectue une recombinaison médiée par la Cre entre les sites loxP. Aucun gène codant la recombinase Cre n’est présent. Ainsi, il n’y a aucun risque d’expression prolongée de la recombinase dans vos cellules et le risque d’événements de recombinaison involontaires est minimisé.
Les applications pour les gesicles de recombinase de Cre comprennent:
- Livraison de la recombinase de Cre pour les études de knockout et de knockin
- Limitation et contrôle des événements de recombinaison spécifiques au site, y compris les délétions, les insertions, les translocations et les inversions
Les gesicles de recombinase de Cre délivrent la protéine de recombinase de Cre à n’importe quel cellule de mammifère rapidement, efficacement et sans acides nucléiques.
Comment gesicles améliore-t-elle les expériences de recombinase de Cre?
La technologie Gesicle ouvre la voie à un large éventail de possibilités expérimentales, avec des fonctionnalités clés qui permettent de gagner du temps et d’offrir des performances inégalées.
| Benefits of Cre Recombinase Gesicles | |
| Feature | Advantage |
| Simple protocol: just apply 10–20 µl of the gesicles to target cells. | Easier to use than plasmid or viral gene delivery. No preparation or pretreatment required. |
| Compatible with most cell types. | Fonctionne bien avec les cellules divisantes et non divisantes, les cellules primaires et les lignées cellulaires. Une faible toxicité maintient la viabilité cellulaire mieux que les autres méthodes de transfection. |
| La protéine est présente et active dès que des gésicules sont appliquées sur les cellules. | Administration efficace et activité élevée de la recombinase Cre. Aucun délai pour la transcription et la traduction. |
| Aucun gène codant la recombinase Cre n’est présent. | Aucun risque d’expression prolongée de la recombinase Cre dans les cellules. Événements de recombinaison imprévus limités. |
| Les gésicules sont marquées avec la protéine fluorescente rouge CherryPicker. | Visualisation facile de la livraison aux cellules. |
Le test de rapport LacZ ci-dessous compare directement deux méthodes d’administration de la recombinase Cre: la transfection de plasmides et les gésicules. Dans cet exemple, l’expression de lacZ n’est possible que lorsque le codon stop flanqué de loxP en amont a été excisé par l’activité de la recombinase. L’utilisation de gesicles a entraîné une excision plus rapide et plus efficace que la transfection plasmidique de la Cre recombinase.
Modification rapide et efficace du génome à l’aide de Gesicles de Recombinase Cre. Une lignée cellulaire hébergeant une cassette d’expression lacZ intégrée et conditionnelle loxP (panneau supérieur) a été soit transfectée avec un plasmide exprimant la Cre recombinase (panneau inférieur, image du milieu), soit traitée avec des gésicules de Cre Recombinase (panneau inférieur, image de droite). 24 heures après le traitement, les cellules ont été colorées pour l’expression de LacZ à l’aide du kit de coloration à la Bêta-Galactosidase.