Kontrol over dine CRE-rekombinaseeksperimenter
- flok dine celler efter behov
- se hurtigere, mere effektiv rekombination
- forenkle eksperimenter med en hurtig, nem protokol
- Minimer utilsigtede rekombinationshændelser
Hvad hvis du havde fuld kontrol over dine rekombinaseeksperimenter? CRE Recombinase Gesicles giver dig denne kontrol og meget mere. Som et kraftfuldt værktøj til genomisk modifikation uden brug af nukleinsyrer forbedrer gesicle-teknologien rekombinaselevering til målceller med opgraderinger i både brugervenlighed og eksperimentel fleksibilitet. Besøg vores tech note for flere data.
Hvad er CRE Rekombinase Gesicles?
Cre-rekombinase er en stedsspecifik rekombinase isoleret fra P1-bakteriofagen, der katalyserer rekombination mellem to 34-BP-lokalitetssteder. Det er almindeligt anvendt til knockout og knockin undersøgelser: DNA-sekvensen placeret mellem to tandem-gentagelser af lokaliteterne kan udskæres for at skabe en deletionsmutant, eller et plasmid indeholdende et enkelt lokalitetssted kan gennemgå stedspecifik integration i et genom indeholdende lokalitet for at skabe en indsættelsesmutant.
CRE Rekombinase Gesicles er celleafledte nanovesicles indeholdende koncentreret Cre rekombinase protein. Når de påføres dine målceller, smelter de sammen med plasmamembranen og udleder aktiv Cre-rekombinase i cellen, hvor den udfører Cre-medieret rekombination mellem lokalplaceringer. Intet CRE-rekombinasekodende gen er til stede. Der er således ingen risiko for vedvarende rekombinaseekspression i dine celler, og chancen for utilsigtede rekombinationshændelser minimeres.
ansøgninger om CRE-Rekombinase-Gesikler inkluderer:
- levering af Cre-rekombinase til knockout-og knockin-studier
- begrænsning og kontrol af stedsspecifikke rekombinationshændelser, herunder sletninger, indsættelser, translokationer og inversioner
CRE-Rekombinase-Gesikler leverer Cre-rekombinaseprotein til enhver pattedyrscelle hurtigt, effektivt og uden nukleinsyrer.
Hvordan forbedrer gesikler CRE-rekombinaseeksperimenter?
Gesicle-teknologi baner vejen for en bred vifte af eksperimentelle muligheder med nøglefunktioner, der sparer tid og tilbyder uovertruffen ydeevne.
| Benefits of Cre Recombinase Gesicles | |
| Feature | Advantage |
| Simple protocol: just apply 10–20 µl of the gesicles to target cells. | Easier to use than plasmid or viral gene delivery. No preparation or pretreatment required. |
| Compatible with most cell types. | fungerer godt med at dele og ikke-dele celler, primære celler og cellelinjer. Lav toksicitet opretholder cellelevedygtighed bedre end andre transfektionsmetoder. |
| Protein er til stede og aktivt, så snart gesikler påføres celler. | effektiv levering og høj aktivitet af Cre-rekombinase. Ingen forsinkelse for transskription og oversættelse. |
| intet CRE-rekombinase-kodende gen til stede. | ingen risiko for vedvarende CRE-rekombinaseekspression i celler. Begrænsede utilsigtede rekombinationshændelser. |
| Gesicles er mærket med CherryPicker rødt fluorescerende protein. | nem visualisering af levering til celler. |
analysen nedenfor sammenligner direkte to CRE-rekombinase-leveringsmetoder: plasmidtransfektion og gesicles. I dette eksempel er ekspression kun mulig, når det opstrøms lokampflankerede stopkodon blev udskåret ved rekombinaseaktivitet. Brug af gesikler resulterede i hurtigere og mere effektiv udskæring end plasmidtransfektionslevering af Cre-rekombinase.
hurtig og effektiv genommodifikation ved hjælp af Cre Rekombinase Gesicles. En cellelinie, der huser en integreret LASP-betinget ekspressionskassette (Toppanel), blev enten transficeret med et plasmid, der udtrykker Cre-rekombinase (Bundpanel, midtbillede) eller behandlet med CRE-Rekombinase-Gesikler (Bundpanel, højre billede). 24 timer efter behandling blev cellerne farvet til Lacs-ekspression ved anvendelse af Beta-Galactosidasefarvningssættet.