Control sobre sus experimentos de recombinasa Cre
Gesículos de recombinasa Cre
- Floxea sus células a pedido
- Vea una recombinación más rápida y eficiente
- Simplifique los experimentos con un protocolo rápido y fácil
- Minimice los eventos de recombinación involuntaria
¿Qué pasaría si tuviera control total sobre sus experimentos de recombinasa? Los Gesículos Cre Recombinase le dan este control y mucho más. Como una herramienta poderosa para la modificación genómica sin el uso de ácidos nucleicos, la tecnología gesicle mejora la administración de recombinasas a las células objetivo con mejoras tanto en la facilidad de uso como en la flexibilidad experimental. Visite nuestra nota técnica para obtener más datos.
¿Qué son los Gesículos de Recombinasa Cre?
La recombinasa Cre es una recombinasa de sitio específico aislada del bacteriófago P1 que cataliza la recombinación entre dos sitios loxP de 34 bp. Es ampliamente utilizado para estudios knockout y knockin: la secuencia de ADN localizada entre dos repeticiones en tándem de sitios de loxP puede ser extirpada para crear un mutante de deleción, o un plásmido que contiene un solo sitio de loxP puede someterse a una integración específica del sitio en un genoma que contiene loxP para crear un mutante de inserción.
Los gesículos de Cre recombinasa son nanovesículas derivadas de células que contienen proteína recombinasa Cre concentrada. Cuando se aplican a las células diana, se fusionan con la membrana plasmática y descargan recombinasa Cre activa en la célula, donde lleva a cabo la recombinación mediada por Cre entre los sitios de loxP. No está presente el gen codificador de la recombinasa Cre. Por lo tanto, no hay riesgo de expresión sostenida de recombinasa en sus células, y se minimiza la posibilidad de eventos de recombinación involuntaria.
Las aplicaciones para los Gesículos de Recombinasa Cre incluyen:
- Administración de recombinasa Cre para estudios knockout y knockin
- Limitación y control de eventos de recombinación específicos del sitio, incluidas eliminaciones, inserciones, translocaciones e inversiones
Los gesículos de recombinasa Cre entregan proteína de recombinasa Cre a cualquier células de mamíferos de forma rápida, eficiente y sin ácidos nucleicos.
¿Cómo mejoran los gesicles los experimentos de recombinasa Cre?
La tecnología Gesicle allana el camino para una amplia gama de posibilidades experimentales, con características clave que ahorran tiempo y ofrecen un rendimiento inigualable.
| Benefits of Cre Recombinase Gesicles | |
| Feature | Advantage |
| Simple protocol: just apply 10–20 µl of the gesicles to target cells. | Easier to use than plasmid or viral gene delivery. No preparation or pretreatment required. |
| Compatible with most cell types. | Funciona bien con células divididas y no divididas, células primarias y líneas celulares. La baja toxicidad mantiene la viabilidad celular mejor que otros métodos de transfección. |
| La proteína está presente y activa tan pronto como se aplican los gesículos a las células. | Entrega eficiente y alta actividad de la recombinasa Cre. Sin demoras para la transcripción y traducción. |
| No hay gen codificador de la recombinasa Cre presente. | No hay riesgo de expresión de recombinasa Cre sostenida en las células. Eventos de recombinación no intencionados limitados. |
| Los gesículos están etiquetados con proteína fluorescente roja CherryPicker. | Fácil visualización de la entrega a las células. |
El ensayo LacZ reporter a continuación compara directamente dos métodos de administración de recombinasa Cre: transfección de plásmidos y gesículas. En este ejemplo, la expresión de LacZ solo es posible cuando el codón de parada flanqueado por loxP aguas arriba fue extirpado por actividad recombinasa. El uso de gesicles resultó en una escisión más rápida y eficiente que la transfección de plásmidos de la recombinasa Cre.
Modificación rápida y eficiente del genoma utilizando Gesicles de Recombinasa Cre. Una línea celular que albergaba un casete de expresión LacZ condicional loxP integrado (panel superior) se transfectó con un plásmido que expresaba Cre recombinasa (panel inferior, imagen central) o se trató con Gesículos de Cre Recombinasa (panel inferior, imagen derecha). 24 horas después del tratamiento, las células se teñieron para la expresión de LacZ utilizando el Kit de tinción de Beta-Galactosidasa.