Controle over uw cre recombinase experimenten
cre Recombinase Gesicles
- Flox uw cellen op verzoek
- zie snellere, efficiëntere recombinatie
- experimenten vereenvoudigen met een snel, eenvoudig protocol
- onbedoelde recombinatiegebeurtenissen minimaliseren
Wat als u volledige controle had over uw recombinase experimenten? Cre Recombinase Gesicles geven u deze controle en nog veel meer. Als krachtig hulpmiddel voor genomic wijziging zonder het gebruik van nucleic zuren, verbetert de gesicle technologie recombinase levering aan doelcellen met verbeteringen in zowel gebruiksgemak als experimentele flexibiliteit. Bezoek onze technische nota voor meer gegevens.
Wat zijn cre Recombinase Gesicles?
Cre recombinase is een locatiespecifieke recombinase geïsoleerd uit de P1-bacteriofaag die recombinatie katalyseert tussen twee 34-bp loxP-locaties. Het wordt wijd gebruikt voor knockout en knockin studies: de opeenvolging van DNA die tussen twee achter elkaar herhalingen van loxp plaatsen wordt gevestigd kan worden uitgesneden om een schrapping mutant tot stand te brengen, of een plasmide die één enkele loxp plaats bevatten kan plaats-specifieke integratie in een genoom ondergaan die loxP bevatten om een insertie mutant tot stand te brengen.
Cre Recombinase Gesikels zijn cel-afgeleide nanovesikels die geconcentreerd Cre recombinase-eiwit bevatten. Wanneer toegepast op uw doelcellen, fuseren zij met het plasmamembraan en ontladen actieve cre recombinase in de cel, waar het cre-bemiddelde recombinatie tussen loxp plaatsen uitvoert. Er is geen cre recombinase codeergen aanwezig. Aldus, is er geen risico van aanhoudende recombinaseuitdrukking in uw cellen, en de kans van onbedoelde recombinatiegebeurtenissen wordt geminimaliseerd.
toepassingen voor CRE Recombinase Gesicles zijn:
- levering van Cre recombinase voor knockout-en knockin-studies
- beperking en controle van plaatsspecifieke recombinatiegebeurtenissen, inclusief deleties, inserties, translocaties en inversies
Cre Recombinase Gesicles leveren Cre recombinase-eiwit aan elke zoogdiercel snel, efficiënt, en zonder nucleïnezuren.
Hoe verbeteren gesicles de CRE recombinase experimenten?
Gesicle technologie effent de weg voor een breed scala aan experimentele mogelijkheden, met belangrijke functies die tijd besparen en ongeëvenaarde prestaties bieden.
| Benefits of Cre Recombinase Gesicles | |
| Feature | Advantage |
| Simple protocol: just apply 10–20 µl of the gesicles to target cells. | Easier to use than plasmid or viral gene delivery. No preparation or pretreatment required. |
| Compatible with most cell types. | presteert goed met delende en niet-dividende cellen, primaire cellen en cellijnen. De lage giftigheid handhaaft de levensvatbaarheid van de cel beter dan andere transfectiemethoden. |
| eiwit is aanwezig en actief zodra gesikels op cellen worden aangebracht. | efficiënte afgifte en hoge activiteit van CRE recombinase. Geen vertraging voor transcriptie en vertaling. |
| geen cre-recombinasecodeergen aanwezig. | geen risico op aanhoudende cre recombinase expressie in cellen. Beperkte onbedoelde recombinatiegebeurtenissen. |
| Gesicles zijn gelabeld met CherryPicker rood fluorescerend eiwit. | eenvoudige visualisatie van de levering aan cellen. |
De LacZ reporter test hieronder vergelijkt direct twee cre recombinase afleveringsmethoden: plasmide transfectie en gesicles. In dit voorbeeld is expressie van lacZ alleen mogelijk wanneer het upstream loxp-geflankeerde stopcodon werd verwijderd door recombinase-activiteit. Het gebruiken van gesicles resulteerde in snellere en efficiëntere uitsnijding dan plasmidetransfectielevering van CRE recombinase.
snelle en efficiënte genoom modificatie met behulp van CRE Recombinase Gesicles. Een cellijn met een geïntegreerde, loxp-voorwaardelijke lacZ-expressiecassette (bovenpaneel) werd ofwel getransfecteerd met een plasmide die Cre recombinase uitdrukt (Onderpaneel, middenbeeld) of behandeld met cre Recombinase Gesicles (Onderpaneel, rechterbeeld). 24 uur na de behandeling werden cellen gekleurd voor LacZ-expressie met behulp van de bèta-Galactosidase Kleuringskit.